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Colloque
Chez la plupart des mammifères, les aminoacyl-tRNA synthétases se retrouvent sous forme de complexes de poids moléculaire très élevé. Par exemple, la glutamyl-tRNA synthétase purifiée partiellement à partir du cerveau de bœuf est associée à un complexe de 5x10^6 daltons. De plus, elle catalyse la formation du glutamyl-tRNA à une vitesse initiale beaucoup plus lente que la vitesse constante finale. (Vadekonbour et Lapointe (1980). Eur.J.Biochem. 109,581-587). Nous avons donc cherché à déterminer quel type de cellules étaient responsables de ce phénomène. Pour ce faire, nous avons repris les études cinétiques d'aminoacylation avec des complexes partiellement purifiés à partir des cellules …
Colloque
Nous voulons déterminer le mécanisme de régulation des enzymes du métabolisme du glutamate dans le cerveau. Pour cette étude, nous avons utilisé des cellules gliales (C6) et neuronales (Neuro-2a) en monoculture. Nous avons déterminé une activité glutamine synthétase (GS) très faible lorsque les cellules gliales sont cultivées en présence de glutamine. Lorsque les cellules sont cultivées en absence de glutamine, l'activité GS reste très faible dans les cellules gliales C6 mais augmente dans les cellules Neuro-2a. Nos résultats diffèrent de ceux obtenus dans les cultures d'astrocytes primaires qui montrent que la GS est localisée exclusivement dans les cellules gliales. Ces …
Colloque
Nous voulons déterminer le mécanisme de régulation des enzymes du métabolisme du glutamate dans le cerveau. Pour cette étude, nous avons utilisé des cellules gliales (C6) et neuronales (Neuro-2a) en monoculture. Nous avons déterminé une activité glutamine synthétase (GS) très faible lorsque les cellules gliales sont cultivées en présence de glutamine. Lorsque les cellules sont cultivées en absence de glutamine, l'activité GS reste très faible dans les cellules gliales C6 mais augmente dans les cellules Neuro-2a. Nos résultats diffèrent de ceux obtenus dans les cultures d'astrocytes primaires qui montrent que la GS est localisée exclusivement dans les cellules gliales. Ces …
Colloque
Nous voulons déterminer le mécanisme de régulation des enzymes du métabolisme du glutamate dans le cerveau. Pour cette étude, nous avons utilisé des cellules gliales (C6) et neuronales (Neuro-2a) en monoculture. Nous avons déterminé une activité glutamine synthétase (GS) très faible lorsque les cellules gliales sont cultivées en présence de glutamine. Lorsque les cellules sont cultivées en absence de glutamine, l'activité GS reste très faible dans les cellules gliales C6 mais augmente dans les cellules Neuro-2a. Nos résultats diffèrent de ceux obtenus dans les cultures d'astrocytes primaires qui montrent que la GS est localisée exclusivement dans les cellules gliales. Ces …
Colloque
La fréquence d'obtention des mutants ribosomiques résistants à la streptomycine (Sm^r) est faible et le nombre de types "classiques" de mutants Sm^r est limité à 4. Toutefois, nous avons montré qu'il est possible d'accroître la fréquence et le nombre de types de mutants Sm^r par traitement avec un agent mutagène suivi d'un long délai phénotypique (7h). La fréquence de mutants varie proportionnellement à la concentration en agent mutagène lorsque le délai phénotypique est court (2.5h); les mutants Sm^r ainsi sélectionnés sont de type classique caractérisé par un changement dans la protéine ribosomique S12. Par contre, la fréquence de mutants varie …
Colloque
La fréquence d'obtention des mutants ribosomiques résistants à la streptomycine (Sm^r) est faible et le nombre de types "classiques" de mutants Sm^r est limité à 4. Toutefois, nous avons montré qu'il est possible d'accroître la fréquence et le nombre de types de mutants Sm^r par traitement avec un agent mutagène suivi d'un long délai phénotypique (7h). La fréquence de mutants varie proportionnellement à la concentration en agent mutagène lorsque le délai phénotypique est court (2.5h); les mutants Sm^r ainsi sélectionnés sont de type classique caractérisé par un changement dans la protéine ribosomique S12. Par contre, la fréquence de mutants varie …
Colloque
Des mutants ribosomiques spontanés d'Escherichia coli K12, résistant à la gentamycine, ont été sélectionnés. Les conséquences de la mutation sur l'activité des ribosomes sont étudiées par des tests de synthèses polypeptidiques in vitro dirigées par des messagers artificiels ou naturels et des mesures du taux d'erreurs de lecture en la présence ou l'absence d'agents induisant des erreurs de lecture. On observe une diminution de l'activité de synthèse des ribosomes avec des messagers artificiels ou naturels, ainsi qu'une réduction du taux d'erreurs de lecture. Les résultats sont discutés en fonction de l'interaction entre le ribosome et la gentamycine, et de l'interférence …
Colloque
Un mutant de Escherichia coli K12Y20 fortement résistant à la streptomycine a été induit par traitement au méthane sulfonate d'éthyle. La protéine S12 de la sous-unité ribosomique 30S, qui est codée par le gène str et qui confère le phénotype de résistance vis-à-vis de la streptomycine (Sm) a été isolée à partir de la souche parente Sm-s et du mutant Sm-r. La comparaison de la composition en acides aminés de la protéine S12 de la souche Sm-s et du mutant Sm-r montre que des substitutions d'acides aminés ont accompagné la mutation. Des cartes peptidiques ont été préparées après digestion par …
Colloque
Une mutante de E.coli K12Y102 conférant Smr a été sélectionnée après traitement au méthanesulfonate d'éthyle. Les ribosomes de la souche conférant Smr et du mutant Smr ont été isolés par centrifugation différentielle. Les sous-unités 30S ont été digérées à la trypsine et la protéine de la sous-unité 30S codée par le locus éridique Sm1, Sm2, a été isolée après chromatographie sur phosphocellulose et Sephadex G-100. La protéine de la souche sensible et la protéine de la mutante ont été digérées en acides aminés, "fingerprint" sur colonne mince après digestion tryptique). Les résultats montrent que plusieurs substitutions d'acides aminés sont associées …
