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Colloque
Le cytoplasme du foie de lapin contient un facteur protéique causant la gélification de l'actine-F musculaire. Cette protéine (hépatocitinogéline) a été purifiée par méthodes classiques et par chromatographie d'affinité sur Sépharose – actine phalloïdine. Les structures quaternaire et secondaire de l'hépatocitinogéline ont été déterminées. La stoechiométrie actine – hépatocitinogéline ainsi que les conditions optimales de gélification quant à la température, force ionique, concentrations des ions Ca et Mg ont été établies.
Colloque
L'amanite phalloïde, champignon très commun en Europe mais rare en Amérique du Nord, est le seul champignon de la région contenant des toxines (amatoxines et phallotoxines) à avoir été étudié de façon systématique. Les méthodes de dosage des toxines employées dans ces études sont non spécifiques et peu sensibles, exigeant souvent la synthèse préalable de phallotoxines radioactives. Dans le but d'établir une nouvelle méthode spécifique de détermination quantitative des phallotoxines et de substances analogues, cette étude se base sur la protection que ces toxines exercent sur l'actine F lors de sa protéolyse.
Colloque
Certaines espèces d'amanites sont connues pour leur grande toxicité. Dans ce travail, des toxines ont été extraites à partir des espèces d'amanites rencontrées dans la Mauricie et séparées par chromatographie sur Sephadex LH-20. L'activité des fractions obtenues a été estimée par leur capacité de protéger l'actine F envers les protéases. La mise au point d'une méthode complémentaire de dosage par chromatographie en phase liquide est en cours.
Colloque
Utilisant une méthode basée sur la capacité de la phalloidine de protéger la F-actine contre l'action protéolytique de la pronase, nous avons mesuré l'activité protectrice des extraits du champignon nord-américain Amanita virosa. Ces extraits s'étant avérés actifs, ils ont été fractionnés sur colonne de Séphadex LH-20. De la douzaine de fractions obtenues, cinq (5) possèdent une forte activité protectrice envers la F-actine. Après purification de ces fractions nous avons obtenu six (6) substances actives. De ces substances une seule possède les caractéristiques du phylloïdin-complexe d'une phallotoxine, notamment celles de la phalloidine. Les autres diffèrent aussi bien des phallotoxines que des …
Colloque
Utilisant une méthode basée sur la capacité de la phalloidine de protéger la F-actine contre l'action protéolytique de la pronase, nous avons mesuré l'activité protectrice des extraits du champignon nord-américain Amanita virosa. Ces extraits s'étant avérés actifs, ils ont été fractionnés sur colonne de Séphadex LH-20. De la douzaine de fractions obtenues, cinq (5) possèdent une forte activité protectrice envers la F-actine. Après purification de ces fractions nous avons obtenu six (6) substances actives. De ces substances une seule possède les caractéristiques du phylloïdin-complexe d'une phallotoxine, notamment celles de la phalloidine. Les autres diffèrent aussi bien des phallotoxines que des …
Colloque
L'acide osmique est un fixateur très utilisé en microscopie électronique. Il a été démontré récemment par d'autres auteurs que l'acide osmique détruit la F-actine par coupure oxydative au niveau de certains acides aminés: cys, met, lys. Ceci rend difficile et même impossible l'observation par microscopie électronique des filaments contractiles de certaines cellules. Nous avons montré par les techniques de viscosimétrie, spectrophotométrie, électrophorèse et microscopie électronique que la phalloidine, un heptapeptide extrait de l'amanite phalloïde, protège in vitro spécifiquement la F-actine du muscle contre la destruction produite par l'acide osmique. Les résultats obtenus par ces différentes méthodes apportent certains éléments sur …
Colloque
Dans la recherche d'une méthode de chromatographie d'affinité destinée aussi bien à étudier certaines propriétés de la myosine qu'à la purifier à partir de tissus non-musculaires, nous avons réussi à immobiliser la F-actine dans des colonnes d'agarose sans modifier chimiquement cette protéine. Les colonnes ainsi obtenues permettent une excellente purification de la myosine et de ses sous-fragments protéolytiques tout en préservant un détail majeur: elles sont peu stables et perdent leur activité et leur actine en 1-2 semaines. L'utilisation du principe actif de l'Amanite phalloïde, la phalloidine, permet une stabilisation spectaculaire des colonnes de F-actine sans changer son affinité envers …
Colloque
Selon certains auteurs, la troponine A (Tr A), telle qu'obtenue par traitement acide du complexe troponine n'est qu'un mélange de nombreuses protéines. Dans l'étude présente, l'électrophorèse de la Tr A sur gel de polyacrylamide en présence de sulfate de dodécyle démontre en effet l'existence de nombreuses bandes. Par contre, en absence d'agents dénaturants, la Tr A se comporte comme une fraction pratiquement homogène. À des concentrations physiologiques d'ions Ca2+, on observe une augmentation significative de l'hélicité de la Tr A tandis que les ions Mg2+ n'affectent pas la structure secondaire de cette protéine. Une purification de la Tr A en …
Colloque
Les mesures de l'intensité de la lumière diffusée sous différents angles par des solutions d'actomyosine (AM) et d'acto-H-méromyosine (AHMM) ont démontré une diminution spontanée de la masse de ces protéines en fonction du temps et correspondant à une dissociation de hauts polymères. Une masse inférieure limite de 1.85 x 10^7 (AM) et de 1.35 x 10^7 (AHMM) a été déterminée. Cette évolution de la masse dans le temps explique les résultats contradictoires obtenus par différents laboratoires. Une analyse détaillée de la fonction de répartition angulaire (P éta) a permis de relier la variation de la fonction à celle de la …
Colloque
Les mesures de l'intensité de la lumière diffusée sous différents angles par des solutions d'actomyosine (AM) et d'acto-H-méromyosine (AHMM) ont démontré une diminution spontanée de la masse de ces protéines en fonction du temps et correspondant à une dissociation de hauts polymères. Une masse inférieure limite de 1.85 x 10^7 (AM) et de 1.35 x 10^7 (AHMM) a été déterminée. Cette évolution de la masse dans le temps explique les résultats contradictoires obtenus par différents laboratoires. Une analyse détaillée de la fonction de répartition angulaire (P éta) a permis de relier la variation de la fonction à celle de la …
