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Colloque
Notre but est d'élucider les mécanismes de toxicité de la 3-méthyladénine (3MeA), une lésion qui apparaît dans le DNA suite à un traitement au méthanesulfonate de méthyle. Un examen de la synthèse protéique du bactériophage T7, dans une souche bactérienne déficiente pour la réparation de la 3MeA, montre que le phage alkylé ne produit aucune protéine tardive. In vitro, la RNA polymérase phagique est beaucoup plus sensible en présence de 3MeA dans le DNA que sa contrepartie bactérienne. Un examen des transcrits établit qu'ils sont de même taille que la matrice soit alkylé ou non. Une analyse du rapport initiation/élongation …
Colloque
Les sites apuriniques ou apyrimidiniques (AP) exercent sur les organismes un effet toxique dont le mécanisme n'est pas encore élucidé. Le sujet de notre étude est de déterminer si la RNA polymérase de T7 peut surmonter l'obstacle constitué par les sites apuriniques et, si elle le peut, à quelle fréquence et de quelle façon (insertion d'une base ou décalage du cadre de lecture) elle réalise l'élongation au niveau de la base manquante. Nous avons donc entrepris d'observer in vivo et in vitro la transcription du DNA phagique porteur de sites AP. Nous avons comparé le développement du phage T7 endommagé …
Colloque
Le bactériophage T7 et son hôte, Escherichia coli, offrent un excellent modèle pour l'étude des mécanismes d'action des agents alkylants, tel le méthanesulfonate de méthyle (MMS). Ces agents forment la classe de produits chimiques toxiques, cancérigènes et mutagènes les plus répandus dans notre environnement. Un traitement au MMS inactive le phage T7. Lorsque le phage T7 alkylé infecte des bactéries (Tag-) incapables de réparer les lésions alkylées dans le DNA, on remarque l'absence de la synthèse des protéines dont les gènes sont transcrits par la RNA polymérase du phage. Nous proposons que l'action de la RNA polymérase soit bloquée par …
Colloque
Le méthanesulfonate de méthyle (MMS), agent alkylant qui méthyle les purines du DNA, inactive le bactériophage T7. Nos recherches ont montré que la synthèse du DNA phagique et la dégradation du DNA bactérien, qui fournissent des précurseurs à cette synthèse, sont retardées et asynchronisées dans les cellules E. coli (souche sauvage infectées par le phage alkylé. Dans les cellules déficientes en réparation de la 3-méthyladénine, il n'y a ni synthèse de DNA phagique ni dégradation du DNA bactérien. Afin de vérifier si une injection défectueuse expliquerait l'inactivation du phage alkylé, nous avons mesuré le taux d'injection du DNA phagique à …
