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Le but de cette étude est d'évaluer l'activité antibactérienne in vitro de plusieurs souches de Lactobacillus sp., Steptococcus et Bifidobacterium, face à des souches aviaires pathogènes sélectionnées et une souche humaine résistante à la méthicilline. Ces souches bactériennes probiotiques ont été sélectionnées sur la base de leur capacité à coloniser le système intestinal du poulet. L'activité antagoniste des bactéries probiotiques est déterminée par la technique des puits de diffusions de l'agar et par une étude cinétique en croissance associée (dans un ratio probiotique/pathogène de 10:1) durant une période allant jusqu'à 72 heures avec des souches de Salmonella ssp., Escherichia coli, …
Les cultures vivantes de bactéries lactiques, dîtes « probiotiques », sont des outils prometteurs pour traiter et prévenir plusieurs maladies infectieuses et favoriser la croissance des animaux d'élevage, réduisant ainsi la dépendance aux antibiotiques qui provoque la sélection de bactéries multi-résistantes. La cytométrie en flux a été utilisée afin d'évaluer la capacité inhibitrice de bactéries lactiques (Bifidobacterium, Streptococcus et 3 espèces de Lactobacillus) en interaction avec Staphylococcus aureus et ses souches susceptibles et résistantes à la méthicilline. Les cellules de S. aureus ont été colorées à l'aide d'une sonde immunofluorescente (anticorps spécifique) afin de les quantifier et de les différencier …
Peu de bactéries lactiques ont été analysées pour la présence d'endonucléases de restriction du type II. Ces enzymes reconnaissent des séquences nucléotidiques spécifiques et clivent le DNA bicaténaire à ces sites. Nous avons découvert une telle activité de restriction dans Lactococcus cremoris G2, une souche isolée d'un levain mixte utilisé dans la fabrication du fromage Cheddar. La présence d'activité de restriction était décelée par l'action des extraits bactériens sur différents substrats tels les DNA des phages λ ou φX174 ou encore le DNA du plasmide pBR322. L'analyse par électrophorèse des patrons de fragmentation de ces différents substrats démontrait la présence …
Peu de bactéries lactiques ont été analysées pour la présence d'endonucléases de restriction du type II. Ces enzymes reconnaissent des séquences nucléotidiques spécifiques et clivent le DNA bicaténaire à ces sites. Nous avons découvert une telle activité de restriction dans Lactococcus cremoris G2, une souche isolée d'un levain mixte utilisé dans la fabrication du fromage Cheddar. La présence d'activité de restriction était décelée par l'action des extraits bactériens sur différents substrats tels les DNA des phages λ ou φX174 ou encore le DNA du plasmide pBR322. L'analyse par électrophorèse des patrons de fragmentation de ces différents substrats démontrait la présence …
Peu de bactéries lactiques ont été analysées pour la présence d'endonucléases de restriction du type II. Ces enzymes reconnaissent des séquences nucléotidiques spécifiques et clivent le DNA bicaténaire à ces sites. Nous avons découvert une telle activité de restriction dans Lactococcus cremoris G2, une souche isolée d'un levain mixte utilisé dans la fabrication du fromage Cheddar. La présence d'activité de restriction était décelée par l'action des extraits bactériens sur différents substrats tels les DNA des phages λ ou φX174 ou encore le DNA du plasmide pBR322. L'analyse par électrophorèse des patrons de fragmentation de ces différents substrats démontrait la présence …
Le bactériophage T7 et son hôte, Escherichia coli, offrent un excellent modèle pour l'étude des mécanismes d'action des agents alkylants, tel le méthanesulfonate de méthyle (MMS). Ces agents forment la classe de produits chimiques toxiques, cancérigènes et mutagènes les plus répandus dans notre environnement. Un traitement au MMS inactive le phage T7. Lorsque le phage T7 alkylé infecte des bactéries (Tag-) incapables de réparer les lésions alkylées dans le DNA, on remarque l'absence de la synthèse des protéines dont les gènes sont transcrits par la RNA polymérase du phage. Nous proposons que l'action de la RNA polymérase soit bloquée par …
Le méthanesulfonate de méthyle (MMS), agent alkylant qui méthyle les purines du DNA, inactive le bactériophage T7. Nos recherches ont montré que la synthèse du DNA phagique et la dégradation du DNA bactérien, qui fournissent des précurseurs à cette synthèse, sont retardées et asynchronisées dans les cellules E. coli (souche sauvage infectées par le phage alkylé. Dans les cellules déficientes en réparation de la 3-méthyladénine, il n'y a ni synthèse de DNA phagique ni dégradation du DNA bactérien. Afin de vérifier si une injection défectueuse expliquerait l'inactivation du phage alkylé, nous avons mesuré le taux d'injection du DNA phagique à …
Intéressés aux mécanismes d'inactivation du phage T7 par le méchanisme du méthyle, nous avons étudié le métabolisme du DNA et la synthèse protéique. Dans des cellules déficientes en enzymes de réparation, infectées par le phage alkylé, des expériences de cinétique ont mis en évidence l'absence de synthèse de DNA. Nous avons observé une déficience marquée de la dégradation du DNA bactérien, processus requis pour la réplication phagique. La production de DNA phagique fut analysée quantitativement par des techniques d'hybridation. En absence de réparation du DNA alkylé, on observe une diminution importante de la dégradation du DNA de l'hôte et de …