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Colloque
L'efficacité de clonage de fragments d'A.D.N. peut être augmentée en réduisant la recircularisation du vecteur, favorisant ainsi la ligation entre le vecteur et les insertions. La désphosphorylation, méthode généralement utilisée à cette fin, est efficace à environ 90%. Nous avons développé une technique difficile à inactiver ce qui complique la procédure (MANIATIS, T. et al.). Nous avons développé une méthode simple qui permet de réduire la recircularisation du vecteur lors du clonage de fragments avec des extrémités 5' saillantes ou franches. La méthode consiste à incorporer un didésoxynucléotide en position 3' terminale du site. En vertu de leur structure, les …
