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Colloque
Saccharopolyspora hirsuta 367 est le producteur de la houmsimycine, un antibiotique macrolide atypique. En utilisant la sonde actI de Streptomyces coelicolor A3(2), nous avons cloné une séquence homologue présente dans le génome de Sacc. hirsuta. Cette séquence hybride est dans le gène actIII Streptomyces coelicolor A3(2). Cette séquence, lorsque clonée dans le vecteur à haut nombre de copies pIJ702, complémente la biosynthèse de l'actinorhodine dans S. coelicolor TK17, une souche mutée dans le gène actI. De plus, cette séquence amène la production de nouvelles activités antibiotiques dans S. coelicolor TK17 et S. lividans TK24. La séquence du fragment homologue au …
Colloque
Saccharopolyspora hirsuta 367 est le producteur de la houmsimycine, un antibiotique macrolide atypique. En utilisant la sonde actI de Streptomyces coelicolor A3(2), nous avons cloné une séquence homologue présente dans le génome de Sacc. hirsuta. Cette séquence hybride est dans le gène actIII Streptomyces coelicolor A3(2). Cette séquence, lorsque clonée dans le vecteur à haut nombre de copies pIJ702, complémente la biosynthèse de l'actinorhodine dans S. coelicolor TK17, une souche mutée dans le gène actI. De plus, cette séquence amène la production de nouvelles activités antibiotiques dans S. coelicolor TK17 et S. lividans TK24. La séquence du fragment homologue au …
Colloque
JHJ-3 est un phage tempéré infectant certaines souches du genre Saccharopolyspora. Ce phage a été isolé de la souche lysogène Saccharopolyspora hirsuta 367 par induction avec la mitomycine C. Par hybridation avec l'ARN isolé d'un lysogène, le(s) gène(s) phagique(s) exprimé(s) dans cette souche lysogène a été localisé dans le fragment de restriction de 5.7 kb de l'extrémité droite selon la carte de restriction établie pour le génome de JHJ-3. Lors de clonage et de séquençage du fragment de 5.7 kb, la séquence a été comparée avec celle de certains gènes de répression. Dans un essai in vivo, ce gène peut …
Colloque
L'efficacité de clonage de fragments d'A.D.N. peut être augmentée en réduisant la recircularisation du vecteur, favorisant ainsi la ligation entre le vecteur et les insertions. La désphosphorylation, méthode généralement utilisée à cette fin, est efficace à environ 90%. Nous avons développé une technique difficile à inactiver ce qui complique la procédure (MANIATIS, T. et al.). Nous avons développé une méthode simple qui permet de réduire la recircularisation du vecteur lors du clonage de fragments avec des extrémités 5' saillantes ou franches. La méthode consiste à incorporer un didésoxynucléotide en position 3' terminale du site. En vertu de leur structure, les …
