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Colloque
La scoliose est la déformation la plus fréquente en orthopédie au niveau pédiatrique et celle-ci se manifeste par une déformation structurale évolutive de la colonne vertébrale, de la cage thoracique et du bassin dans les trois plans de l'espace et dans le temps. Il est à noter que 85% des scolioses sont dites idiopathiques, c’est-à-dire qu’on en ignore la cause alors que les 15% restants sont causées par des malformations congénitales, des maladies neuromusculaires ou associées à des pathologies osseuses et des tissus conjonctifs. Plusieurs perspectives divergentes ont été présentées dans l’espoir de définir plus clairement l’étiologie de la scoliose …
Colloque
Les xylanases sont des hydrolases qui dégradent le xylane, un polymère constitué d'unités de D-xylose liées entre elles par des liaisons β-1,4. La comparaison de différentes séquences d'acides aminés de xylanases avec celles de levures a permis de cibler les acides aminés conservés. Dans le but de leur attribuer un rôle, ces acides aminés ont été substitués par mutagenèse dirigée et le gène ainsi altéré exprimé chez Escherichia coli. La conversion de l'Asp 124 en acide glutamique ou en arginine diminue l'activité catalytique de 5 et 9 fois respectivement. L'étude de la cinétique d'hydrolyse de différents oligosylosides (X, x Y) …
Colloque
Les xylanases sont des hydrolases qui dégradent le xylane, un polymère constitué d'unités de D-xylose liées entre elles par des liaisons β-1,4. La comparaison de différentes séquences d'acides aminés de xylanases avec celles de levures a permis de cibler les acides aminés conservés. Dans le but de leur attribuer un rôle, ces acides aminés ont été substitués par mutagenèse dirigée et le gène ainsi altéré exprimé chez Escherichia coli. La conversion de l'Asp 124 en acide glutamique ou en arginine diminue l'activité catalytique de 5 et 9 fois respectivement. L'étude de la cinétique d'hydrolyse de différents oligosylosides (X, x Y) …
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Les xylanases sont des hydrolases qui dégradent le xylane, un polymère constitué d'unités de D-xylose liées entre elles par des liaisons β-1,4. La comparaison de différentes séquences d'acides aminés de xylanases avec celles de levures a permis de cibler les acides aminés conservés. Dans le but de leur attribuer un rôle, ces acides aminés ont été substitués par mutagenèse dirigée et le gène ainsi altéré exprimé chez Escherichia coli. La conversion de l'Asp 124 en acide glutamique ou en arginine diminue l'activité catalytique de 5 et 9 fois respectivement. L'étude de la cinétique d'hydrolyse de différents oligosylosides (X, x Y) …
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Les xylanases sont des hydrolases qui dégradent le xylane, un polymère constitué d'unités de D-xylose liées entre elles par des liaisons β-1,4. La comparaison de différentes séquences d'acides aminés de xylanases avec celles de levures a permis de cibler les acides aminés conservés. Dans le but de leur attribuer un rôle, ces acides aminés ont été substitués par mutagenèse dirigée et le gène ainsi altéré exprimé chez Escherichia coli. La conversion de l'Asp 124 en acide glutamique ou en arginine diminue l'activité catalytique de 5 et 9 fois respectivement. L'étude de la cinétique d'hydrolyse de différents oligosylosides (X, x Y) …
Colloque
Il n'existe pas de technique de mutagénèse dirigée applicable directement aux streptomycètes. Afin de réaliser ces expériences, il faut avoir cloné le gène d'abord chez E. coli avec un vecteur approprié puis après avoir effectué la mutagénèse, il faut recolier le fragment muté dans un vecteur de streptomycète pour évaluer les effets des mutations introduites. Pour éviter les travaux de sous-clonage, un vecteur navette a été construit. Ce vecteur pFZ12 (6.7 Kb) se compose du phagemid pFZ19 (2.8 Kb) qui se réplique chez E. coli, qui produit le phage filamenteux et qui peut porter une simple brin en utilisant le …
Colloque
Il n'existe pas de technique de mutagénèse dirigée applicable directement aux streptomycètes. Afin de réaliser ces expériences, il faut avoir cloné le gène d'abord chez E. coli avec un vecteur approprié puis après avoir effectué la mutagénèse, il faut recolier le fragment muté dans un vecteur de streptomycète pour évaluer les effets des mutations introduites. Pour éviter les travaux de sous-clonage, un vecteur navette a été construit. Ce vecteur pFZ12 (6.7 Kb) se compose du phagemid pFZ19 (2.8 Kb) qui se réplique chez E. coli, qui produit le phage filamenteux et qui peut porter une simple brin en utilisant le …
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Il n'existe pas de technique de mutagénèse dirigée applicable directement aux streptomycètes. Afin de réaliser ces expériences, il faut avoir cloné le gène d'abord chez E. coli avec un vecteur approprié puis après avoir effectué la mutagénèse, il faut recolier le fragment muté dans un vecteur de streptomycète pour évaluer les effets des mutations introduites. Pour éviter les travaux de sous-clonage, un vecteur navette a été construit. Ce vecteur pFZ12 (6.7 Kb) se compose du phagemid pFZ19 (2.8 Kb) qui se réplique chez E. coli, qui produit le phage filamenteux et qui peut porter une simple brin en utilisant le …
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Il n'existe pas de technique de mutagénèse dirigée applicable directement aux streptomycètes. Afin de réaliser ces expériences, il faut avoir cloné le gène d'abord chez E. coli avec un vecteur approprié puis après avoir effectué la mutagénèse, il faut recolier le fragment muté dans un vecteur de streptomycète pour évaluer les effets des mutations introduites. Pour éviter les travaux de sous-clonage, un vecteur navette a été construit. Ce vecteur pFZ12 (6.7 Kb) se compose du phagemid pFZ19 (2.8 Kb) qui se réplique chez E. coli, qui produit le phage filamenteux et qui peut porter une simple brin en utilisant le …
Colloque
Le gène xylA du plasmide pTAF18 de S. lividans 1AF18 ainsi que le gène xylB du plasmide pTAF42 de S. lividans 1AF42 ont été sous-clonés indépendamment chez E. coli JM83 à l'aide du phagémide pTZ18-U. Les transformants obtenus contenant les plasmides pXylA, pXylB ou pXBI et exprimant les xylanases produisent des zones d'éclaircissement sur gélose au xylan contenant du bleu trypan, indiquant la présence de ces gènes chez E. coli nécessite la présence d'un promoteur hétérologue qui permet de démontrer très clairement que l'on retrouve majoritairement dans l'espace périplasmique. Une étude comparant l'activité par western a démontré que les xylanases …
