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Traitement des infections chroniques à l'aide d'antibiotiques encapsulés dans des liposomes
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La résistance bactérienne aux antibiotiques constitue depuis quelques années un problème majeur en médecine clinique. L'imperméabilité des membranes bactériennes jouerait un rôle de premier plan dans cette résistance que ce soit seule ou en synergie. Les infections pulmonaires chroniques causées par Pseudomonas aeruginosa chez les patients atteints de fibrose kystique illustrent bien ce phénomène de résistance. Le but principal de notre travail de recherche était de développer une préparation liposomale susceptible d'augmenter l'effet bactéricide des antibiotiques en favorisant leur pénétration à travers la paroi bactérienne. Une des formulations que nous avons développée a provoqué une augmentation drastique de l'effet bactéricide …

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Évaluation in vitro de l'efficacité bactéricide de chimoliposomes contre différentes espèces de bactéries
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Le but du présent travail était de vérifier l'efficacité bactéricide de notre formulation liposomale DPPC/DMPG contenant de la tobramycine, contre différentes espèces de bactéries. Cette préparation a récemment permis d'éliminer les infections pulmonaires chroniques causées par Pseudomonas aeruginosa (PA) chez un modèle animal (Beaulac et al., accepté pour publication: Antimicrob. Agents Chemother.). L'étude consiste à évaluer la survie bactérienne à l'aide de courbes de croissance en présence de PBS seul, de PBS incorporé dans des liposomes, de tobramycine libre et de tobramycine encapsulée dans des liposomes. Plusieurs bactéries, telle Burkholderia cepacia, Xanthomonas maltophilia, Escherichia coli, Staphyloccus aureus ainsi que d'autres …

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Étude du mode de pénétration d'un antibiotique contenu dans des chémoimmunoliposomes chez Pseudomonas aeruginosa
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L'efficacité bactéricide in vitro de chémoimposomes anti-P. aeruginosa a déjà été démontrée (Lagacé et al., 1990, Nacucchio et al., 1988). Depuis, nous avons développé des chémoimposomes ciblés à l'aide d'un anticorps monoclonal reconnu antigène situé à la surface de la bactérie vivante. À l'aide d'anticorps dirigés contre la tobramycine et contre le principal constituant des liposomes, un phospholipide synthétique (le dipalmitoyl phosphatidylcholine), nous étudions le mode d'interaction immunologique et immunoélectronicoscopie. Cette technique couplée à l'utilisation de l'or colloïdal nous permet d'étudier le mode de pénétration de l'antibiotique des liposomes dans les bactéries ainsi que de devenir des phospholipides liposomiques lors …

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Définition de 4 épitopes de l'élastase du Pseudomonas aeruginosa à l'aide d'anticorps monoclonaux
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Des anticorps monoclonaux (AMs) contre l'élastase du Pseudomonas aeruginosa (PA) ont été produits à partir de cellules de rate de souris BALB/c immunisées avec de l'élastase purifiée et fusionnées avec des cellules de myélome P3-X63-Ag8-U1. Des tests de compétition ont démontré que les anticorps monoclonaux (AMs) qui réagissaient contre l'élastase, une protéine de 33,000-Da, reconnaissaient 4 épitopes différents. Ces épitopes sont partagés par la totalité des souches cliniques et de référence (International Antigen Typing Scheme strains) positives pour la sécrétion d'élastase tel que démontré par des études d'immunoneutralisation et de dot-immunoessai.

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Réponse immune anti-Pseudomonas aeruginosa des patients atteints de fibrose kystique: analyse des sous-classes d'immunoglobulines G par immunoprecipitation
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Le but de cette étude était de tenter d'expliquer pourquoi certains patients atteints de fibrose kystique (FK) malgré une infection chronique par Pseudomonas aeruginosa (Pa) réussissent à maintenir un état pulmonaire satisfaisant. Pour répondre à cette question nous avons analysé les sous-classes d'IgG dirigés contre les antigènes (ag) individuels du Pa chez 22 patients atteints de FK et colonisés par le Pa pendant au moins 7 ans (FK Pa+). Ainsi des Western blots, à partir de bactéries fixées et de protéines de la membrane externe purifiées, réalisées avec les sérums de ces patients, ont été analysés à l'aide d'anticorps monoclonaux …

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Production d'anticorps monoclonaux contre les exopolysaccharides muqueux de Pseudomonas aeruginosa pour le développement d'un vaccin anti-idiotype
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Les rares patients adolescents atteints de fibrose kystique qui ont un système respiratoire sain, ont un type d'anticorps qui se porte contre les infections pulmonaires chroniques causées par Pseudomonas aeruginosa muqueux (PA). Ces anticorps induisent l'opsonisation contre les exopolysaccharides (EP) du PA. Les vaccins traditionnels ici sont inefficaces sinon dangereux. Un vaccin anti-idiotype induirait chez l'individu la production du type d'anticorps voulu. En vue de la production de ce vaccin, les étapes suivantes ont été réalisées: 1) Définitions de conditions optimales pour le maintien "in vitro" de la sécrétion des exopolysaccharides muqueux; 2) sélection de souches; 3) mise au point …

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Développement d'un vaccin anti-idiotype contre les exopolysaccharides muqueux du Pseudomonas aeruginosa: Étape préliminaires
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Le Pseudomonas aeruginosa (Pa), une bactérie opportuniste, infecte de façon chronique la majorité des patients atteints de fibrose kystique (FK). La transformation des souches de Pa non-muqueuses en souches muqueuses produisant des exopolysaccharides muqueux (MEP) accélère de façon marquée la détérioration pulmonaire de ces patients. Une étude récente de Pier et al. (1987) a démontré que les patients FK âgés d'au moins 12 ans et qui ne sont toujours pas colonisés par le Pa diffèrent des conditions spécifiques que les patients FK colonisés par le Pa, ce qui concerne la présence d'anticorps spécifiques contre le MEP, participant à l'opsonophagocytose. Les …

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Évaluation immunologique comparative de patients adolescents atteints de fibrose kystique résistants et non résistants aux infections chroniques à Pseudomonas aeruginosa
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Le but de ce projet est de mettre en évidence des facteurs immuns susceptibles d'expliquer le pourquoi de la résistance accrue au Pseudomonas aeruginosa (Pa) chez certains patients atteints de fibrose kystique (FK). Nous avons comparé l'aponie immune humorale des patients résistants et non-résistants, contre les différents antigènes du Pa (protéines de la membrane externe et protéines de la bactérie totale) en utilisant la technique de SDS-PAGE et de "Western blot". Cette étude s'intéresse également aux différences concernant les sous-classes des immunoglobulines G spécifiques au Pa. Les résultats que nous avons obtenus jusqu'à maintenant semblent indiquer que les patients non …

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Développement et caractérisation d'anticorps monoclonaux spécifiques aux principaux antigènes de la membrane externe de Pseudomonas aeruginosa
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La présence de complexes immuns circulants chez les patients atteints de fibrose kystique (FK) et colonisés par Pseudomonas aeruginosa (Pa) semble constituer un facteur déterminant de ce qui concerne le degré de morbidité et de mortalité chez ces patients. Il a été démontré que l'utilisation de sérums polyvalents pour l'identification des antigènes impliqués dans la formation de ces complexes entraînait des phénomènes de non-spécificité. C'est pourquoi nous avons développé des anticorps monoclonaux contre des principales protéines de la membrane externe (OMPS) du Pa. Des travaux préliminaires nous ont permis de développer une nouvelle méthode d'extraction des OMPS à l'aide du …

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Évaluation des complexes immuns circulants chez les patients atteints de fibrose kystique
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La présence de complexes immuns circulants chez les patients atteints de fibrose kystique (FK), dont le système pulmonaire est colonisé par le Pseudomonas aeruginosa (Pa) a été mise en évidence par plusieurs chercheurs. Toutefois jusqu'à maintenant, une corrélation entre la présence de complexes immuns et une détérioration du système pulmonaire des patients n'a pas été clairement démontrée. Nos études préliminaires tendent à démontrer l'existence d'une corrélation positive entre la présence des complexes immuns circulants et une atteinte radiologique faible. Deux tests ont été utilisés pour évaluer la présence des complexes immuns, soit le 'Clq binding essay' et l'anti Clq 'Solid …

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