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Communication
Le Neovastat est un agent antiangiogénique multifonctionnel dérivé du cartilage de requin. Il interfère avec certaines étapes critiques du processus d’angiogenèse dont l’inhibition des métalloprotéinases matricielles (MMPs). Puisque les MMPs jouent un rôle crucial dans le remodelage tissulaire dans des conditions pathologiques tel que le cancer, il y a un intérêt thérapeutique à cibler et à développer des inhibiteurs des MMPs. Dans le but de purifier et identifier les inhibiteurs de MMP-2 contenus dans le Néovastat, un schéma de purification en quatre étapes comprenant un fractionnement au sulfate d’ammonium, une chromatographie échangeuse anionique ainsi qu’une séparation selon le point isoélectrique …
Communication
Nous avons récemment démontré que le Néovastat, un composé antiangiogénique extrait du cartilage de requin, stimule l'activation du plasminogène in vitro en facilitant sa conversion en plasmine via un processus dépendant de l'activateur tissulaire du plasminogène (t-PA). Une forte activité t-PA est associée avec un bon prognostic pour des patients atteints de certains types de cancers dont le mélanome et le cancer du sein. Nous avons purifié les molécules responsables de la stimulation de la génération de la plasmine, en utilisant un schéma de purification comportant trois étapes : la filtration sur gel, la focalisation isoélectrique et l'électrophorèse préparative. Nous …
Colloque
Les carboxyle méthyltransférases (CMT) catalysent la réaction de transfert d'un groupement méthyl provenant du S-adénosyl-L-méthionine sur des résidus carboxyl d'une grande variété de protéines. On retrouve deux types de carboxyméthylation chez les eucaryotes: sur résidu L-isospartate (CMT de classe II) et sur résidu S-farnésyl-L-cystéine situé en position C-terminale (CMT de classe III). Afin de discriminer ces deux activités dans des fractions subcellulaires du cortex rénal (cytosol, membranes à brosse en brosses (MBB) et membranes basolatérales (MBL)) nous avons utilisé deux peptides synthétiques très spécifiques à chacune des classes de CMT. Les peptides Thr-Ser-IsoAsp-Tyr-Ser-Tyr-Lys-Tyr (substrat pour classe II) et S-farnésyl-Leu-Ala-Arg-Tyr-Lys-Cys (substrat …
Colloque
Les carboxylméthyltransférases protéiques catalysent la réaction de transfert d'un groupement méthyl provenant du S-adénosyl-L-méthionine sur des résidus carboxyl d'une grande variété de protéines. Jusqu'à présent, ces activités enzymatiques n'ont été détectées que dans la fraction soluble de la plupart des cellules étudiées. Nous avons récemment identifié une activité méthyltransférase dans la membrane apicale des cellules du cortex rénal. Afin de caractériser cette activité au niveau moléculaire nous avons purifié l'enzyme. Les membranes isolées de reins de rats ont été solubilisées à l'aide du CHAPS, un détergent zwitterionique. L'enzyme a été purifiée par chromatographie d'exclusion moléculaire sur Superose 6 et par …
Colloque
Les carboxylméthyltransférases protéiques catalysent la réaction de transfert d'un groupement méthyl provenant du S-adénosyl-L-méthionine sur des résidus carboxyl d'une grande variété de protéines. Jusqu'à présent, ces activités enzymatiques n'ont été détectées que dans la fraction soluble de la plupart des cellules étudiées. Nous avons récemment identifié une activité méthyltransférase dans la membrane apicale des cellules du cortex rénal. Afin de caractériser cette activité au niveau moléculaire nous avons purifié l'enzyme. Les membranes isolées de reins de rats ont été solubilisées à l'aide du CHAPS, un détergent zwitterionique. L'enzyme a été purifiée par chromatographie d'exclusion moléculaire sur Superose 6 et par …
