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Colloque
La phosphorylation des protéines est cruciale pour la régulation des fonctions cellulaires. Pour identifier les protéine-kinases dans le cytosol de prostate humaine, nous avons d'abord procédé à l'électrophorèse des protéines en milieu dénaturant puis à leur renaturation suivie d'une incubation en présence d'ATP-[γ32P]. L'analyse autoradiographique nous a permis de détecter neuf sérine-thréonine kinases, et cela démontré par l'analyse des acides aminés phosphorylés. Pour détecter les tyrosine-kinases (TK), un polymère de glutamate et de tyrosine (poly GT), a été ajouté aux préparations avant l'électrophorèse. Suite à la renaturation et l'incubation avec l'ATP, les protéines ont été pontées (glutaraldéhyde) puis le gel …
