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Colloque
L’absorption intestinale du glucose de même que sa réabsorption rénale s’accomplissent grâce à un système de cotransport sodium/glucose localisé à la face apicale de ces épithélia. La protéine (SGLT1) responsable de cette fonction est constituée chez l’humain de 662 acides aminés et comporte 14 segments transmembranaires. L’utilisation des oocytes de Xenope s’est imposé au fil du temps comme un modèle de choix pour l’expression et l’étude de SGLT1 autant par sa simplicité et sa polyvalence technique que par son rendement élevé de synthèse. Le cotransporteur exprimé dans l’oocyte démontre des propriétés similaires à ce qui est retrouvé dans les tissus …
Colloque
La caractérisation moléculaire des systèmes de transport des acides aminés s'est avérée jusqu'à maintenant impossible en raison des problèmes reliés à la purification de cette classe de protéines membranaires hautement hydrophobes et qui ne sont exprimées qu'en très faible quantité dans la cellule. Une nouvelle approche utilisant l'oocyte de Xenopus laevis comme vecteur d'expression permet de contourner ces difficultés. L'expression du cotransporteur rénal Na+/proline a été évaluée sur des oocytes injectés à l'ARNm-poly(A)+ total extrait de cortex rénal de lapin. Après 4 jours d'incubation, l'accumulation Na+-dépendante de 3H-L-proline dans les oocytes (ARNm) est 2 fois supérieure à celle mesurée dans …
Colloque
La survie limitée des préparations d'entérocytes isolés et l'absence de lignées entérocytaires viables en culture nous ont amenés à considérer la lignée cellulaire tumorale CACO-2, dérivée de carcinomes de colon humain, comme modèle possible pour l'étude de la régulation des fonctions absorbo-digestives intestinales en culture. En effet, ces cellules confluentes démontrent une différenciation entérocytaire spontanée qui est identifiable par des critères morphologiques et fonctionnels. Les cellules démontrent en microscopie électronique la présence d'une bordure en brosse qui, biochimiquement, possède toutes les caractéristiques enzymatiques typiques des entérocytes. On peut également observer une accumulation d'α-méthylglucose (analogue non métabolisable du glucose) sensible à …
