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Colloque
Les arabinofuranosidases sont des enzymes capables d'hydrolyser les résidus arabinose contenus dans divers polysaccharides complexes, dans des oligosaccharides ou des substrats synthétiques plus simples. Le gène codant pour une α-L-arabinofuranosidase (abfA) a été cloné de façon homologue dans un vecteur multicopie (pIJ702) chez Streptomyces lividans. Un clone hyperproducteur a été sélectionné et la production de cette enzyme intracellulaire a été réalisée. Différentes étapes (éclatement de mycélium, précipitation au sulfate d'ammonium, chromatographie par interactions hydrophobes, chromatographie échangeuse d'ions et criblage moléculaire) ont permis de purifier cette enzyme arabinofuranosidase à un poids moléculaire de 67,000 Da sur SDS-PAGE et environ 250,000 Da …
Colloque
Les arabinofuranosidases sont des enzymes capables d'hydrolyser les résidus arabinose contenus dans divers polysaccharides complexes, dans des oligosaccharides ou des substrats synthétiques plus simples. Le gène codant pour une α-L-arabinofuranosidase (abfA) a été cloné de façon homologue dans un vecteur multicopie (pIJ702) chez Streptomyces lividans. Un clone hyperproducteur a été sélectionné et la production de cette enzyme intracellulaire a été réalisée. Différentes étapes (éclatement de mycélium, précipitation au sulfate d'ammonium, chromatographie par interactions hydrophobes, chromatographie échangeuse d'ions et criblage moléculaire) ont permis de purifier cette enzyme arabinofuranosidase à un poids moléculaire de 67,000 Da sur SDS-PAGE et environ 250,000 Da …
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Les arabinofuranosidases sont des enzymes capables d'hydrolyser les résidus arabinose contenus dans divers polysaccharides complexes, dans des oligosaccharides ou des substrats synthétiques plus simples. Le gène codant pour une α-L-arabinofuranosidase (abfA) a été cloné de façon homologue dans un vecteur multicopie (pIJ702) chez Streptomyces lividans. Un clone hyperproducteur a été sélectionné et la production de cette enzyme intracellulaire a été réalisée. Différentes étapes (éclatement de mycélium, précipitation au sulfate d'ammonium, chromatographie par interactions hydrophobes, chromatographie échangeuse d'ions et criblage moléculaire) ont permis de purifier cette enzyme arabinofuranosidase à un poids moléculaire de 67,000 Da sur SDS-PAGE et environ 250,000 Da …
Colloque
Les xylanases sont des hydrolases qui dégradent le xylane, un polymère constitué d'unités de D-xylose liées entre elles par des liaisons β-1,4. La comparaison de différentes séquences d'acides aminés de xylanases avec celles de levures a permis de cibler les acides aminés conservés. Dans le but de leur attribuer un rôle, ces acides aminés ont été substitués par mutagenèse dirigée et le gène ainsi altéré exprimé chez Escherichia coli. La conversion de l'Asp 124 en acide glutamique ou en arginine diminue l'activité catalytique de 5 et 9 fois respectivement. L'étude de la cinétique d'hydrolyse de différents oligosylosides (X, x Y) …
