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Nouvelle approche d’identification de gènes essentiels in vivo en maladie infectieuse
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Pseudomonas aeruginosa (PA) est un pathogène opportuniste causant des infections secondaires graves chez les personnes atteintes de mucoviscidose. Plusieurs facteurs de virulence de PA ont été identifiés, mais leur importance respective dans le mécanisme d’initiation et/ou de maintien de l’infection n’a pas été démontrée. Nous avons développé une nouvelle méthode permettant d’identifier des gènes essentiels à l’initiation et/ou au maintien de l’infection par PA. Cette méthode découle de la mutagénèse avec étiquettes uniques ("signature tagged mutagenesis" (STM)) où l’identification de gènes essentiels in vivo se fait par sélection phénotypique négative. C’est une méthode qui comporte plusieurs avantages. Entre autres, elle …

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Identification de domaines homologues aux composantes régulant les gènes de virulence de Bordetella pertussis chez Pseudomonas aeruginosa
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Pseudomonas aeruginosa est un pathogène opportuniste responsable de plus de 90 % du taux de mortalité chez les patients atteints de la mucoviscidose. Comme divers microorganismes, P. aeruginosa produit plusieurs facteurs de virulence qui entrainent la colonisation des voies respiratoires de l’hôte. Chez B. pertussis, le pathogène responsable de la coqueluche, il existe un système à deux composantes qui régule l’expression des gènes de virulence. Des homologues des différents domaines des protéines BvgS et BvgA ont été isolés chez P. aeruginosa par la méthode du Pooled Cloned PCR BAC (PCPB) en criblant une banque de P. aeruginosa clonée dans le …

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Caractérisation d'une pompe à résistance multiple (MDR) homologue au locus emrAB de E. coli chez Pseudomonas aeruginosa
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Plusieurs micro-organismes possèdent des pompes ayant une faible spécificité à un substrat. Ces organismes sont capables d’expulser des toxines ayant une conformation structurale différente. Ce type de résistance à plusieurs drogues a été nommé pompes à résistances multiples. La pompe EmrAB chez E. coli confère une résistance à des protonophores (carbonyl cyanide m-chlorophenyl hydrazone [CCCP]) et certains antibiotiques (acide nalidixique, norfloxacin et thiolactomycin). Un homologue de emrAB de E. coli a été identifié chez P. aeruginosa. Suite à un séquençage au hasard d’une banque de P. aeruginosa dans le vecteur pTZ18R, deux recombinants ayant des inserts de 1631 pbs et …

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Étude du cytochrome P-450 dans des conditions de prolifération et de différenciation cellulaires sur des hépatocytes de rat adulte en culture primaire
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Le travail présenté ici a pour but de développer le potentiel d'un modèle in vitro pouvant servir, entre autres, pour des études sur la cancérogenèse ou d'évaluation de toxicité de xénobiotiques. Les résultats ont été obtenus par l'analyse du marqueur biochimique essentiel dans les processus de biotransformation des xénobiotiques: le cytochrome P-450. Ce modèle étudie chez les hépatocytes de rat adulte en culture primaire. L'activité de O-désalkylation des cytochromes P-450 a été suivie pendant cinq jours sous différentes conditions de culture. Cette maximisation des activités enzymatiques par la transformation du 4-cyanoc-2-chloroxyxoumarine, Deux milieux de culture basés sur 1= 1.15 (ADHOV) …

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