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Le VNPI est responsable d'une maladie aiguë chez les alevins de salmonidés en pisciculture pouvant avoir des pertes économiques importantes. Nous avons produit des AMC contre les sérotypes A1 et A2, ceci afin de déterminer le(s) épitope(s) impliqué(s) dans la neutralisation, d'analyser les relations antigéniques entre les souches et d'établir un test de diagnostic. Les AMC ont d'abord été sélectionnés par ELISA, puis testés pour leur propriété neutralisante. Par radioimmunoprécipitation, les AMC neutralisants ont permis de localiser un épitope conformationnel sur la protéine interne VP2 du virus. Par immunofluorescence, d'autres AMC non neutralisants réagissent avec la protéine interne VP3. Ces …
La souche NADL du virus BVD, concentrée par ultrafiltration sur colonne creuse, a été purifiée par ultracentrifugation en gradients de saccharose. Le virus a été localisé par infectivité et les pics infectieux examinés, après coloration négative, par microscopie électronique en présence ou absence d'antiséum spécifique, puis la qualité de la purification virale a de plus été évaluée par électrophorèse en gel de polyacrylamide en présence de SDS et par immunoprécipitation après transfert sur filtre de nitrocellulose (Western blot). Les résultats démontrent la présence de particules virales ovales à pléomorphie de 60-100 nm de diamètre présentant parfois des projections de surface …
Un test ELISA sensible et spécifique pour mesurer les anticorps IgG contre le BVDV a été développé. Des feuillets de cellules rénales de bovins MDBK infectées avec le BVDV ont servi comme antigène. Le titre ELISA a été établi avec une différence de 0.05 entre les valeurs de densité optiques des sérums bovins sur cellules MDBK infectées et non infectées. Les valeurs ELISA ont été comparées avec le titre correspondant au test de séroneutralisation (SN) pour 50 sérums obtenus de bovins vaccinés ou suite à une infection. Les résultats obtenus se résument à la façon suivante: (i) un coefficient de …
Des anticorps monoclonaux contre le virus de l'hépatite murine type 3 (MHV-3) ont été produits suite à la fusion de cellules spléniques de souris A/J, infectées avec le virus, et de cellules du myélome NS-1 de souris BALB/c. Le criblage des anticorps a été fait par deux techniques immunoenzymatiques, l'ELISA et le "Dot Blot", ce qui nous a permis de sélectionner des clones positifs par l'une ou l'autre des méthodes ou par les deux. Nous avons obtenu ainsi 34 clones sécréteurs qui réagissent en immuno-empreinte contre les deux sous-unités de la protéine de l'enveloppe virale de poids moléculaire approximatif de …
L'adhérence bactérienne aux cellules vivantes est l'une des étapes initiales de l'infection. Une microéthode a été mise au point pour étudier les mécanismes régissant l'adhérence de Neisseria gonorrhoeae (N.g.) à des cellules spécifiques. Cette microéthode a été utilisée pour l'étude comparative de l'adhérence de grands nombres de souches bactériennes et pour l'analyse des mécanismes d'adhérence par inhibition de la réaction avec des saccharides spécifiques ou analogues. La plupart des souches de N.g. étudiées avaient une affinité plus grande pour la lignée cellulaire HEp2 (fibroblastes de poumon d'embryon humain; Institut Armand-Frappier) que pour les lignées HeLa, HEp-2, K13 et Chang Liver. …
Mycoplasma hyopneumoniae (Mhp) est l'agent responsable de la pneumonie enzootique porcine et entraîne chaque année de très lourdes pertes économiques. Le diagnostic précoce de la maladie permet d'identifier les jeunes animaux porteurs avant qu'ils n'infectent les élevages vers lesquels ils sont destinés. Un tel diagnostic est difficile en raison de l'existence d'antigènes communs à plusieurs mycoplasmes. Afin d'améliorer la précision du diagnostic de la pneumonie enzootique, nous avons entrepris le développement d'un test ELISA spécifique à Mhp qui ne contiendrait qu'un seul antigène de surface propre à Mhp. Pour ce faire, nous avons choisi de préparer des anticorps monoclonaux spécifiques …