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La phospholipase A2 (PLA2) est une enzyme hydrosoluble d'environ 14 kDa qui hydrolyse la liaison ester en position SN-2 des glycérophospholipides pour former un lysolipide et un acide gras. Son activité est principalement modulée par les caractéristiques physico-chimiques des membranes. La mélittine est un polypeptide amphiphile de 26 acides aminés (2,8 kDa) organisé en hélice alpha imparfaite dû à la présence d'un coude bêta. Des données de la littérature suggèrent qu'il existe un synergisme entre la PLA2 et la mélittine. En effet, il a été observé que l'activité enzymatique de la PLA2 augmente beaucoup en présence de mélittine. On ne …
De nombreux peptides et protéines ont pour cible la membrane cellulaire; ils en modifient la perméabilité et sont cytotoxiques. Dans de nombreux cas, on peut proposer que ces toxines agissent par action directe sur la trame lipidique des membranes. Par spectroscopie, on peut décrire les modifications induites par les peptides sur l'ordre et la dynamique des chaînes lipidiques. Les effets varient selon l'état physique des lipides, leur charge et les caractéristiques amphiphiles des peptides. Les propriétés collectives, stabilité des phases et caractéristiques de transition, sont aussi modifiées de façon drastique et variable selon les différents peptides. La morphologie des édifices …
Nous avons étudié l'interaction de Lys-Trp-Lys avec des vésicules de phosphatidylglycérol naturel (PG) ou synthétique : dimyristoyl et dipalmitoylphosphatidylglycérol (DMPG, DPPG) en observant les changements de fluorescence du Trp. Nous avons ainsi montré la nécessité d'une complémentarité de charge pour positionner le peptide à l'interface. D'autre part, l'intensité, les durées de vie et le maximum d'émission de fluorescence indiquent que le Trp est situé entre les têtes polaires, au niveau du glycérol. Des compétitions avec des peptides de structure Lys-X-Lys ont permis d'estimer la part des résidus hydrophobes dans l'interaction. Ces peptides diminuent progressivement la température de transition, Tm, de …
Pour mieux comprendre le phénomène de séparation de phases induite par certains ions ou protéines sur des mélanges phospholipidiques, nous avons étudié l'effet de la mélittine (Mel) sur des mélanges binaires de lipides par polarisation de fluorescence. La formation de complexes lipides/Mel met parallèlement en jeu les forces de types hydrophobes et électrostatiques. Dans le mélange dipalmitoyl phosphatidylcholine (DPPC)/distearoylphosphatidylcholine (DSPC) où on observe un déplacement monotone de la transition gel-cristal liquide vers les basses températures, la différence de longueur de chaînes acyles n'est pas suffisante pour induire cette démixion. Cependant, dans le cas du mélange distearoylphosphatidylcholine (DSPC)/dipalmitoylphosphatidylglycérol (DPPG) où autant …