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Colloque
L'oxydation, par le périodate, des dérivés m-, p- méthylés de l'adrénaline et de la noradrénaline, donne la vanilline, l'iso-vanilline et la vétratraldéhyde que l'on sépare par chromatographie gazeuse. L'action de la catéchol-O-méthyltransférase grossièrement purifiée de foie de rats, sur la noradrénaline, ne conduit pas seulement à la formation de normétanéphrine. On obtient un mélange des dérivés de m-, p- méthylés dans le rapport 2.5/1.0. Il n'y a pas de dérivés m-, p- méthylés. Nous voulons savoir si les inhibiteurs de l'enzyme modifient le rapport m-/p-, et s'il reste le même à toutes les étapes de purification de l'enzyme.
Colloque
L'étude de la stéréospécificité enzymatique vis-à-vis de substrats dérivés d'acides aminés a été entreprise depuis de nombreuses années. L'analyse des produits d'hydrolyse se faisait à l'aide de méthodes polarimétriques ou de D-amine-oxydase. Nous venons ajouter, à cet arsenal, une méthode chimique beaucoup plus sensible que les précédentes surtout lorsqu'on utilise des produits radioactifs. Elle consiste à coupler à l'acide aminé libéré un autre acide aminé optiquement actif. Le couple de diastéréoisomères obtenu est alors résolu par chromatographie sur colonne. La surface des pics donne le pourcentage de chacune des formes. Cette méthode a permis de détecter 4% de forme D …
