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Utilisation d’un système génétique pour identifier les acides aminés essentiels de l’extension C-terminale de Dbp4, une ARN hélicase de la famille DEAD-box
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Dbp4 est une enzyme nucléolaire qui joue un rôle essentiel dans la maturation de l’ARN ribosomique 18S. Comme toutes les ARN hélicases de la famille « DEAD-box », Dbp4 contient neuf motifs conservés formant le cœur catalytique de l’enzyme qui est flanqué par des extensions N- et C-terminales. Nous avons déjà montré que l’extension C-terminale est essentielle à la fonction de Dbp4 et que cette région contient un motif « coiled-coil » conservé chez tous les orthologues de Dbp4.Nous voulons identifier les acides aminés de l’extension C-terminale qui sont essentiels à la fonction de Dbp4. Nous utilisons un système génétique …

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La fonction de l’ARN hélicase Dbp4 et ses partenaires dans la maturation des ARN ribosomiques
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La biogenèse des ribosomes dans le nucléole est un processus complexe et finement régulé. Plus de 200 facteurs nucléolaires sont nécessaires pour générer les sous-unités 40S et 60S du ribosome. Nos travaux portent sur Dbp4, une ARN hélicase essentielle à la production d’ARNr 18S chez la levure Saccharomyces cerevisiae. Des mutations dans DDX10, l’homologue de Dbp4 chez l’humain, ont été associées au développement du cancer du sein. Nous avons choisi d’utiliser la levure comme modèle parce que la biogenèse des ribosomes est un processus très conservé chez les eucaryotes. Nous avons trouvé que Dbp4 participe à la maturation des pré-ARNr …

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Le rôle de Dbp4 dans la croissance cellulaire
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Dbp4 est une ARN hélicase essentielle à la croissance cellulaire. Chez l’humain, des mutations dans cette enzyme (nommée DDX10) ont été associées au développement de cancers du sein. Comme Dbp4 est phylogénétiquement conservée, nous avons choisi d’étudier sa fonction dans la levure ''Saccharomyces cerevisiae'' pour des raisons de facilité expérimentale et de disponibilité d’outils moléculaires. Nous avons trouvé que Dbp4 participe à la maturation des ARN ribosomiques (ARNr) en formant un complexe avec les protéines Enp2 et Bfr2, dont les homologues sont respectivement NOL10 et AATF (''apoptosis-antagonizing transcription factor''), une protéine qui est surexprimée dans les tumeurs. Des tests double-hybrides …

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