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Clonage de protéines qui se lient à eIF-4E
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Chez les eucaryotes, la régulation de la traduction se fait principalement au niveau de l'initiation, soit le processus par lequel la sous-unité ribosomale 40S et l'ARNt initiateur lient l'ARNm. L'association de l'ARNm avec la sous-unité 40S est médiée par eIF-4E, une protéine qui lie le cap des ARNm. L'importance de eIF-4E a été démontrée par des expériences où la surexpression de eIF-4E mène à la transformation cellulaire alors que la diminution de son abondance résulte en un phénotype de croissance retardée. Deux protéines ayant la propriété de se lier à eIF-4E, 4E-BP1 et 4E-BP2 ont récemment été clonées. Il a …

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Régulation de la synthèse protéique chez les cellules eucaryotes en mitose
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La baisse du taux de synthèse protéique observée lors de la mitose chez les eucaryotes est reliée, selon certains auteurs, à une déficience au niveau de l'initiation. Afin de déterminer si certains facteurs, jouant un rôle important à ce niveau (ex: cap binding proteins (CBPs) - reconnaissant la structure "cap" au bout 5' du mRNA et déstabilisant la structure secondaire) seraient modifiés ou dégradés pendant la mitose, nous avons développé un modèle viral utilisant les virus de la poliomyélite (mRNA sans "cap") et de la stomatite vésiculaire (VSV) (mRNAs ont un "cap"). Les cellules CV-1 en métaphase supporteraient à tous …

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Synthèse et propriétés du trinuléotide à l'embranchement formé lors du processus de transmission de l'ARN messager
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La plupart des gènes de protéines d'eucaryotes contiennent des séquences "intron". La copie originale d'ARN (l'ARN pré-messager) de ces gènes contient aussi des séquences "intron". Ces séquences "intron" sont éliminées pendant le processus de production de l'ARN messager. Un mécanisme fascinant implique la formation d'une structure originale de lasso ("lariat"). Au point de jonction de ce lasso on retrouve un trinuléotide A très unique. La synthèse et les propriétés biologiques de ces trinuléotides rares seront décrites.

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Étude du mode d'interaction entre le mRNA et le cytosquelette des cellules eucaryotes
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Le cytosquelette est une structure fibreuse composée de trois types de filaments: les microfilaments, les microtubules et les filaments intermédiaires. Certains travaux rapportent qu'il y aurait une relation fonctionnelle entre la traduction du mRNA et son attachement au cytosquelette. Nous avons étudié cette hypothèse en développant un modèle viral utilisant le virus de la poliomyélite et de la Stomatite Vésiculaire (VSV). Le mRNA du VSV se comportant de façon semblable au mRNA cellulaire, nous avons étudié son devenir lors de la surinfection par poliovirus (inhibe la synthèse protéique cellulaire) des cellules déjà infectées par VSV. Nos résultats démontrent entre autres, …

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Synthèse protéique chez les cellules 3T3 mises en suspension
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Lorsque des cellules non-transformées nécessitant l'apport d'un substrat solide pour leur croissance sont mises en suspension, la synthèse protéique est réduite peu à peu. Afin d'étudier les divers aspects de cette inhibition nous avons mis en suspension des cellules 3T3. Le mRNA isolé de cellules en suspension demeure actif dans différents systèmes de traduction in vitro alors que des lysats préparés à partir de cellules 3T3 en suspension n'ont pas un taux de traduction comparable à des lysats de cellules 3T3 normales. La mise en suspension des cellules est de plus accompagnée par un relâchement des mRNA du cytosquelette. Nous …

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