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Colloque
Le cytosquelette est un système intégré et fonctionnel de fibres (actine, tubuline, protéines filamenteuses) à la fois dynamique et coordonné. Une hypothèse suggère l'existence d'un réseau ultra-fin de filaments, le réseau microtrabéculaire, qui régirait l'ensemble des fonctions cellulaires reliées à ce système. Un protocole d'extraction du cytosquelette des leucocytes humains et de préparation pour la microscopie électronique a été développé dans ce laboratoire, et nous présentons les traitements successifs suivants: (1) Hanks + pipes + sucrose (HaPIS), pH 7,4; (2) tampon stabilisateur (STAB = pipes + HEPES + EGTA + Mg++), pH 6,9; (3) tampon d'extraction (STAB + Triton X …
Colloque
L'utilisation des membranes de polycarbonate présente des avantages; leur malléabilité diminue d'autant le stress dû aux manipulations et leur porosité favorise un libre échange des solutions de fixation. Elles permettent le maintien des cellules et de leurs configurations spatiales durant les étapes de préparation. L'influence de la solution tampon (Hanks + pipes + sucrose) et du cycle de traitement (GAOTTO) utilisé ne joue pas un rôle uniquement au moment de la fixation mais aussi dans la capacité de coloration et les propriétés des coupes. Les données obtenues nous permettent de présumer que les leucocytes nécessaires à leur analyse sont bien …
