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Colloque
Dans la plupart des cas, la résistance bactérienne vis-à-vis des pénicillines et des céphalosporines est due à la production d'une ßeta-lactamase. Cette enzyme inactive l'antibiotique par hydrolyse et la transformation de l'acide correspondant. Cette propriété permet de suivre une réaction enzymatique par acidimétrie et de mesurer les constantes Km et Vmax rapidement et avec une précision acceptable. Par cette méthode, nous avons étudié et caractérisé les ßeta-lactamases chez une douzaine de souches d'entérobactéries présentant des profils de résistance comparables à celui conféré par le gène TEM ainsi que deux autres souches présentant un profil de résistance différent. Les avantages de …
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Dans la plupart des cas, la résistance bactérienne vis-à-vis des pénicillines et des céphalosporines est due à la production d'une ßeta-lactamase. Cette enzyme inactive l'antibiotique par hydrolyse et la transformation de l'acide correspondant. Cette propriété permet de suivre une réaction enzymatique par acidimétrie et de mesurer les constantes Km et Vmax rapidement et avec une précision acceptable. Par cette méthode, nous avons étudié et caractérisé les ßeta-lactamases chez une douzaine de souches d'entérobactéries présentant des profils de résistance comparables à celui conféré par le gène TEM ainsi que deux autres souches présentant un profil de résistance différent. Les avantages de …
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Dans la plupart des cas, la résistance bactérienne vis-à-vis des pénicillines et des céphalosporines est due à la production d'une ßeta-lactamase. Cette enzyme inactive l'antibiotique par hydrolyse et la transformation de l'acide correspondant. Cette propriété permet de suivre une réaction enzymatique par acidimétrie et de mesurer les constantes Km et Vmax rapidement et avec une précision acceptable. Par cette méthode, nous avons étudié et caractérisé les ßeta-lactamases chez une douzaine de souches d'entérobactéries présentant des profils de résistance comparables à celui conféré par le gène TEM ainsi que deux autres souches présentant un profil de résistance différent. Les avantages de …
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On a mis au point une méthode de chromatographie d'affinité destinée à purifier des ßeta-lactamases de bactéries résistantes aux antibiotiques du groupe des pénicillines ou céphalosporines. La purification d'une céphalosporinase d'une souche de Klebsiella pneumoniae est présentée ici. Les colonnes d'affinité sont obtenues en fixant sur un support, la Sépharose 4B activée au CNBr, un inhibiteur réversible de l'enzyme, la céphalosporine C, qui permet de piéger l'enzyme. La chromatographie est faite à partir d'un extrait bactérien brut et se déroule dans un gradient de NaCl. La purification de l'enzyme est excellente. L'application de cette méthode de chromatographie aux différentes classes …
