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Les groupements cystéine jouent un rôle clef dans la stabilisation de la structure tertiaire des protéines tout en constituant des sites potentiels de régulation de l'activité protéique par réactions d’oxydoréduction. Nos travaux antérieurs sur les cellules endothéliales d’aortes de bovins ont mené à l’identification de deux canaux potassiques dont l’activité s'est avérée particulièrement sensible à la présence d'agents oxydants. Ainsi, une inhibition de l'activité d'un canal potassique activé par le calcium de conductance intermédiaire (IKCa) fut observée suite à l’application interne de DTNB, de thimérosal ou de peroxyde. L'ajout de ces agents au milieu externe est demeuré toutefois sans effet, …
Les canaux potassiques activés par le calcium, K(Ca2+) jouent un rôle prépondérant dans la réponse calcique des cellules endothéliales à un ensemble des stimuli hormonaux. L'activité de ces canaux dépend de plusieurs facteurs dont l'état d'oxydation du canal. Nos travaux récents ont mené au clonage d'un canal K(Ca2+) de conductance intermédiaire, IK(Ca2+), à partir de cellules endothéliales humaines. La topologie du canal prédit une structure à six segments transmembranaires comprenant une région pore située entre les segments S5 et S6. Une des caractéristiques principales du IK(Ca2+) est la présence dans S6 de quatre cystéines (C267, C269, C276 et C277) dans …
Des études récentes ont montré qu'une surproduction de radicaux libres oxygénés (RLO) pouvait contribuer à l'état dysfonctionnel des cellules endothéliales (CE) dans certaines conditions pathologiques comme l'hypertension artérielle. Le Ca2+ intracellulaire est le principal second messager responsable de la sécrétion par les cellules endothéliales d'agents vasoactifs comme le NO et l'endothéline. Une étude en fura-2 fut donc entreprise afin de déterminer les effets des RLO sur la réponse Ca2+ dépendante de l'InsP3 dans les cellules endothéliales d'aorte de rats génétiquement hypertendus (SHR) et normotendus (Sprague Dawley (SD)). Nos résultats indiquent que la libération de Ca2+ des réservoirs intracellulaires des cellules …
Les canaux K+, dont l'activité dépend de la concentration cytosolique de Ca2+ (K(Ca2+)), se divisent en trois classes distinctes selon leur conductance; les Maxi K(Ca2+) dont la conductance est >100 pS, les canaux IK(Ca2+) de conductance intermédiaire (20 pS-50pS) et les canaux de très faible conductance (<10 pS). Nos travaux en "patch-clamp" ont porté essentiellement sur la caractérisation moléculaire d'un canal IK(Ca2+) de 40 pS exprimé dans les cellules endothéliales BAE et dans les cellules HeLa. Les résultats obtenus ont permis premièrement de mettre en évidence que l'activité de ce canal était indépendante du potentiel membranaire et que la courbe …
On considère généralement que l'enzyme Na-K-ATPase est responsable du maintien des gradients ioniques et, par conséquent, du volume des cellules épithéliales. L'utilisation de la ouabaïne, inhibiteur spécifique de cette enzyme, devrait donc produire un gonflement cellulaire. Dans le cas des cellules en culture MDCK, on observe, en mesurant les contenus intracellulaires, une augmentation du sodium et du chlore et une perte de potassium et d'acides aminés. Par contre, on n'observe aucune augmentation du volume cellulaire (pour des cellules en suspension). Ceci s'explique par le fait que le gain en chlore n'est pas accompagné d'une augmentation du contenu total en anions. …