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Synthèse de l'ADN complémentaire (ADNc) à l'ARN de la souche U (avirulente) du virus de la mosaïque du tabac (TMV) et insertion dans pBR322 et clonage chez E. coli
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Nous avons synthétisé l'ADN complémentaire simple brin de l'ARN viral polyadénylé in vitro et homopolymérisé par le dATP les hybrides RNA-DNA hétérogènes obtenus. L'insertion directe des hybrides de ces fragments a été faite dans le site Bam HI, du gène de résistance à la tétracycline de pBR322, homopolymérisé par le dTTP. Après transformation d'E. coli HB101 par les plasmides hybrides, différents clones correspondants à des insertions d'environ 1600, 1200, 980, 700 et 500 paires de bases ont été sélectionnés par leur résistance à l'ampicilline et leur sensibilité à la tétracycline. Nous poursuivons actuellement l'hybridation moléculaire des clones marqués au dCTP-32P …

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