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Colloque
La 17b-hydroxystéroïde déshydrogénase de type 1 humaine (17b-HSD1) joue un rôle important dans la conversion des estrogènes. Sa principale activité est de convertir l’estrone en 17b-estradiol en utilisant un cofacteur, le NAD(P)H. La molécule EM519 est le nom donné au 17a-butyl-17b-estradiol, un inhibiteur compétitif de la 17b-HSD1. Notre groupe a cristallisé le complexe ternaire 17bHSD1-NADP+-EM519 par la méthode de co-cristallisation. L’enzyme a été purifiée à l’aide d’une colonne Mono Q et à été concentrée en présence de 20% glycérol et de 0,06% b-octylglucoside. La concentration finale de l’échantillon est supérieure à 15 mg/ml. La méthode de diffusion de vapeur a …
Colloque
La 17ß-hydroxystéroide déshydrogénase estrogénique humaine (17ß-HSD1) est responsable de la dernière étape de formation de tous les estrogènes actifs, ceux-ci impliqués dans la prolifération des cellules cancéreuses du sein. Afin de mieux comprendre le mécanisme de réaction de la 17ß-HSD1, nous avons effectués les travaux suivants: dans un premier temps, nous avons déterminé les constantes cinétiques (Km, Kcat...) de la 17ß-HSD1 à 37°C dans un tampon phosphate à pH 7.5 afin de reproduire le mieux possible les conditions physiologiques. L’activité du type 1 fut testée pour les substrats suivants: 20 alpha-hydroxyprogestérone, DHT, DHEA, estradiol et estrone. Nous avons obtenus les …
