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La transplantation de myoblastes est une approche potentielle pour le transfert de gènes dans le muscle. Cependant son efficacité dépend du nombre de copies génomiques du donneur pouvant être incorporées à long terme dans le tissu de l'hôte. Les méthodes nécessitant l'incorporation de nucléotides radioactifs ou de composés fluorescents dans les cellules greffées ne permettent pas de mesurer l'influence de la prolifération cellulaire dans les jours suivants la greffe. Alors que la mesure de l'activité enzymatique amenée par des transgènes introduits dans les cellules est facilement perturbée par des variations transcriptionnelles indépendantes du nombre de cellules. Des myoblastes mâles furent …
La transplantation de myoblastes normaux dans des muscles dystrophiques est une voie thérapeutique envisagée pour le traitement de la dystrophie musculaire de Duchenne (DMD). Le succès de ces greffes est toutefois limité par le système immunitaire. Ce rejet pourrait être contré en transplantant au patient ses propres cellules myogéniques transfectées avec le gène de la dystrophine, mais il a été démontré que les myoblastes d'un patient DMD âgé de plus de 4 ans ne prolifèrent presque plus en culture (Blau et al., 1990). La modification génétique de fibroblastes dermiques à l'aide d'un vecteur rétroviral codant pour un gène impliqué dans …
Plusieurs myopathies pourraient être éventuellement traitées par la transplantation de myoblastes. Cependant, cette approche nécessite d'énormes quantités de ces cellules qui doivent en plus garder la propriété de fusionner aux fibres musculaires de l'hôte. L'immortalisation de ces précurseurs myogéniques a donc été suggérée pour augmenter leur capacité proliférative. Nous avons voulu examiner le comportement de myoblastes immortalisés suite à leur transplantation. Pour ce faire, plusieurs cultures primaires de muscle ont été obtenues de différentes espèces animales et subséquemment transfectées avec l'antigène T. La fusion in vitro des clones résultants a ensuite été vérifiée. Seuls les clones fusionnant correctement in vitro …
Plusieurs myopathies pourraient être éventuellement traitées par la transplantation de myoblastes. Cependant, cette approche nécessite d'énormes quantités de ces cellules qui doivent en plus garder la propriété de fusionner aux fibres musculaires de l'hôte. L'immortalisation de ces précurseurs myogéniques a donc été suggérée pour augmenter leur capacité proliférative. Nous avons voulu examiner le comportement de myoblastes immortalisés suite à leur transplantation. Pour ce faire, plusieurs cultures primaires de muscle ont été obtenues de différentes espèces animales et subséquemment transfectées avec l'antigène T. La fusion in vitro des clones résultants a ensuite été vérifiée. Seuls les clones fusionnant correctement in vitro …
Plusieurs myopathies pourraient être éventuellement traitées par la transplantation de myoblastes. Cependant, cette approche nécessite d'énormes quantités de ces cellules qui doivent en plus garder la propriété de fusionner aux fibres musculaires de l'hôte. L'immortalisation de ces précurseurs myogéniques a donc été suggérée pour augmenter leur capacité proliférative. Nous avons voulu examiner le comportement de myoblastes immortalisés suite à leur transplantation. Pour ce faire, plusieurs cultures primaires de muscle ont été obtenues de différentes espèces animales et subséquemment transfectées avec l'antigène T. La fusion in vitro des clones résultants a ensuite été vérifiée. Seuls les clones fusionnant correctement in vitro …
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Dans plusieurs types de cancer, la prolifération cellulaire non contrôlée semble découler d'une défaillance dans le mécanisme contrôlant la "mort programmée" ou apoptose. Des études récentes ont montré que des altérations des niveaux élevés de glutathion provoquaient chez l'emphécé l'induction d'apoptose dans plusieurs modèles cellulaires. Ces résultats suggèrent l'implication des radicaux libres dans le mécanisme apoptotique. Les radicaux libres ou le redox cellulaire de ces oxydants dans ces processus, nous utilisons des fibroblastes cellulaires de cellules Jurkat E6-1 surexprimant la glutathion peroxydase Se-dépendante (GSHpx) à des niveaux élevés. L'apoptose peut être induite dans la lignée Jurkat par différents stimuli physiologiques …
Une nouvelle technique, basée sur le marquage des extrémités terminales 3' de l'ADN par une réaction d'échange catalysée par la T4 ADN polymérase, a été mise au point pour analyser quantitativement les dommages à l'ADN de sites apuriniques/apyrimidiniques (AP) induits in vivo par divers agents clastogéniques. Les endonucléases IV de E. coli et la ADNase TDP libèrent des groupes hydroxyles linéaires sur les sites AP, induisant ainsi des "gaps" ont été spécifiquement détectés par les extrémités terminales 3' générées par la T4 ADNase. Cette technique a été utilisée pour mesurer la cinétique de formation de ces dommages et la capacité …