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Colloque
Le t-RNA total est isolé du cerveau de veau en utilisant la technique d'extraction au phénol et ensuite purifié par chromatographie sur Séphadex G-200. Le t-RNA ainsi obtenu est désaminoacylé par traitement à pH alcalin et cette préparation est utilisée comme substrat pour les aminoacyl t-RNA synthétases. Les synthétases sont préparées à partir d'un surnageant à haute vitesse (100,000xg; 2 hres), et sont purifiées par chromatographies successives sur colonne de Séphadex G-100 et DEAE-cellulose. Le taux d'aminoacylation du t-RNA est mesuré en variant divers paramètres, comme les concentrations de t-RNA et d'enzyme et les temps d'incubation. Vingt différents acides aminés …
