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La majorité des cancers chez l'humain sont des carcinomes dérivant de cellules épithéliales qui expriment des kératines. OBJECTIF : Développer une méthode applicable en clinique de détection par RT-PCR des cellules néoplasiques circulantes dans le sang basée sur l'expression de la kératine 19. La méthode doit être capable de détecter quelques dizaines de cellules parmi environ 15 millions de leucocytes. MÉTHODE : Nous avons opté pour une préparation des spécimens à partir de 3ml de sang prélevé avec EDTA. Après lyse des érythrocytes, le culot leucocytaire est traité au TRIZOL pour en extraire l'ARN total. La transcription inverse est réalisée …