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Analyse des leucotriènes (LT) dans le sang après stimulation de la synthèse ex vivo
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Le but de notre étude était de développer une méthode d'analyse pour évaluer la synthèse des LT et autres métabolites de l'acide arachidonique (AA) dans le sang entier "ex vivo". Nous avons analysé les niveaux de métabolites de l'AA par les plaquettes et leucocytes du sang entier (hépariné) après incubation avec un ionophore (A23187) pendant 5 min à 37°C. Le sang est centrifugé et le plasma dénaturé par l'addition de 1 volume de méthanol/acétone (1/1, v/v) contenant 25 ng de PGB2 (B2) et de 19-OH-PGB2 (standards internes) par ml de précipité est éliminé par centrifugation et le surnageant analysé directement …

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Formation accrue d'acide phosphatidique (PAoH) et de diacylglycérol (DAG) par des neutrophiles humains préincubés "in vitro" avec le GM-CSF: implication d'une phospholipase D
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Le GM-CSF, un facteur de croissance aux effets multiples sur les neutrophiles humains matures, est impliqué dans l'augmentation des réponses cellulaires induites par les stimuli inflammatoires. Nous avons, sur des neutrophiles humains normaux préincubés avec 400pM GM-CSF, effectué l'analyse quantitative et qualitative par HPLC, TLC et GC-MS de la formation des seconds messagers intracellulaires, DAG, PAoH et inositol 1,4,5-triphosphate (IP3), induite par le fMLP-Leu-Phe (f-MLP). Cette étude démontre que, par lui-même, le GM-CSF n'affecte pas le taux de base de PAoH et de DAG, ni l'accumulation précoce de DAG et d'IP3 (30 sec) induite par le fMLP. En revanche, après …

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