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Colloque
Afin d'étudier le transporteur rénal du phosphate, des lapins ont été immunisés avec un peptide synthétique de 14 acides aminés fait à partir de la séquence d'un gène codant pour le transporteur rénal du phosphate du lapin (gène NaPi-1). La spécificité et l'affinité des anticorps, ainsi que la taille des protéines reliées au transport de phosphate ont été déterminées par immunoprécipitation à l'aide de membrane de polivinylidène difluorure (PVDF). L'immunobravage efficace par détection de peptide synthétique (~0.1 mM) entraîne la perte de détection de protéines de membranes à bordure en brosse (MBB) pouvant être reliées au cotransporteur Na+/Pi. Ces protéines …
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La purification d'un transporteur membranaire fonctionnel implique le choix de conditions physico-chimiques compatibles avec le maintien de son activité biologique lors de chacune des étapes de solubilisation, de chromatographie et de reconstitution. Le transporteur responsable de la réabsorption rénale du phosphate s'est avéré particulièrement sensible à la composition des tampons d'extraction. Celui-ci coïncide avec les lipides extraits de la membrane rénale et ne peut être réactivé en absence de l'association du peu des lipides extraits du duodénum. Le milieu d'extraction doit contenir une faible concentration de sodium pour permettre l'extraction de l'eau de la solution. Le glycérol peut cependant être …
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La purification d'un transporteur membranaire fonctionnel implique le choix de conditions physico-chimiques compatibles avec le maintien de son activité biologique lors de chacune des étapes de solubilisation, de chromatographie et de reconstitution. Le transporteur responsable de la réabsorption rénale du phosphate s'est avéré particulièrement sensible à la composition des tampons d'extraction. Celui-ci coïncide avec les lipides extraits de la membrane rénale et ne peut être réactivé en absence de l'association du peu des lipides extraits du duodénum. Le milieu d'extraction doit contenir une faible concentration de sodium pour permettre l'extraction de l'eau de la solution. Le glycérol peut cependant être …
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La purification d'un transporteur membranaire fonctionnel implique le choix de conditions physico-chimiques compatibles avec le maintien de son activité biologique lors de chacune des étapes de solubilisation, de chromatographie et de reconstitution. Le transporteur responsable de la réabsorption rénale du phosphate s'est avéré particulièrement sensible à la composition des tampons d'extraction. Celui-ci coïncide avec les lipides extraits de la membrane rénale et ne peut être réactivé en absence de l'association du peu des lipides extraits du duodénum. Le milieu d'extraction doit contenir une faible concentration de sodium pour permettre l'extraction de l'eau de la solution. Le glycérol peut cependant être …
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La purification d'un transporteur membranaire fonctionnel implique le choix de conditions physico-chimiques compatibles avec le maintien de son activité biologique lors de chacune des étapes de solubilisation, de chromatographie et de reconstitution. Le transporteur responsable de la réabsorption rénale du phosphate s'est avéré particulièrement sensible à la composition des tampons d'extraction. Celui-ci coïncide avec les lipides extraits de la membrane rénale et ne peut être réactivé en absence de l'association du peu des lipides extraits du duodénum. Le milieu d'extraction doit contenir une faible concentration de sodium pour permettre l'extraction de l'eau de la solution. Le glycérol peut cependant être …
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Dans le but de purifier et d'identifier la protéine transportrice responsable de la réabsorption rénale du phosphate, nous avons mis au point un protocole de reconstitution qui permet de mesurer son activité après chaque étape de la purification. Le transporteur reconstitué à partir du rein de bœuf possède les principales caractéristiques du transporteur natif dont une affinité semblable (40 μM) pour le phosphate. La captation de phosphate par les protéoliposomes est fortement stimulée (2000-300%) par la présence d'un gradient transmembranaire de sodium. La taille moléculaire du transporteur a été évaluée avec la technique d'inactivation par irradiation. Le transporteur bovin possède …
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Dans le but de purifier et d'identifier la protéine transportrice responsable de la réabsorption rénale du phosphate, nous avons mis au point un protocole de reconstitution qui permet de mesurer son activité après chaque étape de la purification. Le transporteur reconstitué à partir du rein de bœuf possède les principales caractéristiques du transporteur natif dont une affinité semblable (40 μM) pour le phosphate. La captation de phosphate par les protéoliposomes est fortement stimulée (2000-300%) par la présence d'un gradient transmembranaire de sodium. La taille moléculaire du transporteur a été évaluée avec la technique d'inactivation par irradiation. Le transporteur bovin possède …
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Dans le but de purifier et d'identifier la protéine transportrice responsable de la réabsorption rénale du phosphate, nous avons mis au point un protocole de reconstitution qui permet de mesurer son activité après chaque étape de la purification. Le transporteur reconstitué à partir du rein de bœuf possède les principales caractéristiques du transporteur natif dont une affinité semblable (40 μM) pour le phosphate. La captation de phosphate par les protéoliposomes est fortement stimulée (2000-300%) par la présence d'un gradient transmembranaire de sodium. La taille moléculaire du transporteur a été évaluée avec la technique d'inactivation par irradiation. Le transporteur bovin possède …
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Dans le but de purifier et d'identifier la protéine transportrice responsable de la réabsorption rénale du phosphate, nous avons mis au point un protocole de reconstitution qui permet de mesurer son activité après chaque étape de la purification. Le transporteur reconstitué à partir du rein de bœuf possède les principales caractéristiques du transporteur natif dont une affinité semblable (40 μM) pour le phosphate. La captation de phosphate par les protéoliposomes est fortement stimulée (2000-300%) par la présence d'un gradient transmembranaire de sodium. La taille moléculaire du transporteur a été évaluée avec la technique d'inactivation par irradiation. Le transporteur bovin possède …
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Dans le but de purifier et d'identifier la protéine transportrice responsable de la réabsorption rénale du phosphate, nous avons mis au point un protocole de reconstitution qui permet de mesurer son activité après chaque étape de la purification. Le transporteur reconstitué à partir du rein de bœuf possède les principales caractéristiques du transporteur natif dont une affinité semblable (40 μM) pour le phosphate. La captation de phosphate par les protéoliposomes est fortement stimulée (2000-300%) par la présence d'un gradient transmembranaire de sodium. La taille moléculaire du transporteur a été évaluée avec la technique d'inactivation par irradiation. Le transporteur bovin possède …
