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Colloque
La plupart des toxines insecticides du bacille de Thuringe (Bacillus thuringiensis, ou Bt) sont transformées en protéines actives par les protéases intestinales de l'insecte. Le domaine I de la forme active, formé d'hélices-alpha amphipathiques, est responsable de l'insertion de la toxine dans la membrane luminale des cellules intestinales, créant un pore peu sélectif qui abolit les gradients transmembranaires et provoque la mort cellulaire. Bien que la Cry9Ca et deux de ses mutants (R164K et R164A) soient actifs contre les larves de Manduca sexta, leur capacité à former des pores dans des vésicules isolées de la membrane intestinale de l'insecte semble …
Communication
Les toxines Cry de Bacillus thuringiensis sont composées de trois domaines structuraux. Le domaine I, formé par un groupe d'hélices alpha, est probablement responsable de l'insertion de la toxine dans la membrane luminale de l'intestin moyen des larves des insectes sensibles et de la formation d'un pore. Les domaines II et III, composés de feuillets bêta, interagissent avec des récepteurs spécifiques situés à la surface de cette membrane et sont donc responsables de la spécificité de la toxine. Les domaines I et II de Cry1Aa sont reliés par quatre ponts salins : D222-R281, R233-E288, R234-E274 et D242-R265. L'élimination de ces …
Communication
Les toxines du bacille de Thuringe (Bacillus thuringiensis) agissent en formant des pores dans la membrane luminale de l’intestin moyen des insectes sensibles. Parce que le pH de la lumière intestinale des lépidoptères est très alcalin, les effets du pH sur la formation et les propriétés des pores ont été examinés systématiquement dans des vésicules de la membrane intestinale du sphynx du tabac (Manduca sexta) avec une technique de gonflement osmotique. En présence de la toxine Cry1C, la perméabilité membranaire des vésicules est beaucoup plus élevée à pH 6,5, 7,5 et 8,5 qu'à pH 9,5 et 10,5 quel que soit …
Communication
Le bacille de Thuringe est un insecticide biologique largement utilisé comme alternative aux insecticides chimiques. Les toxines produites par cette bactérie agissent en formant des pores après s’être liées à des récepteurs spécifiques situés sur la surface luminale des cellules épithéliales de l’intestin moyen des larves de l’insecte. La membrane luminale est caractérisée par un fort potentiel membranaire jouant un rôle important dans l’absorption de nombreux solutés provenant de la lumière intestinale. Nous avons évalué l’utilité d’une sonde fluorescente, le DiS-C3(5), afin d’analyser les effets des toxines sur le potentiel membranaire généré dans des vésicules de membrane à bordure en …
Communication
La toxicité des protéines insecticides du bacille de Thuringe (Bacillus thuringiensis) est due à leur capacité à former des pores dans la membrane luminale de l'intestin moyen des insectes sensibles. Les hélices alpha du domaine I de ces toxines sont probablement responsables de l'insertion de la toxine dans la membrane et de la formation des pores. Dans le but de préciser le rôle respectif de ces hélices, chacun des résidus chargés des hélices 3 et 4 de la toxine Cry1Aa, à l'exception de ceux qui participent à des ponts salins intramoléculaires, a été remplacé, par mutagénèse dirigée, par un acide …
Colloque
Le tubule proximal dans le rein de mammifère, est le segment responsable de la majorité du travail de réabsorption. De ce fait, les systèmes de transport présents dans la membrane basolatérale des cellules de ce tubule doivent constamment s'adapter à ceux de la membrane apicale, afin de minimiser les changements de volume cellulaire et du contenu intracellulaire, suite à un taux de transport considérable et fluctuant. Il a été montré, dans notre laboratoire, que, dans le tubule proximal de lapin, une augmentation de volume produite par un choc hypotonique, ou par une stimulation du transport de substrats organiques, produisait une …
Colloque
Les toxines entomopathogènes du bacille de Thuringe sont très largement utilisées dans la lutte contre la tordeuse du bourgeon de l'épinette (Choristoneura fumiferana) et la spongieuse (Lymantria dispar), les deux principaux ravageurs des forêts canadiennes. On admet en général que ces protéines modifient la perméabilité membranaire des cellules intestinales des insectes. Dans le but de documenter ces effets et d'établir des corrélations avec la toxicité in vivo, nous avons comparé les effets de différentes toxines sur le potentiel membranaire des cellules épithéliales de l'intestin fraîchement isolé et perfusé de larves de L. dispar du stade 3 ou 4. Ce potentiel, …
Colloque
Les toxines de Bacillus thuringiensis constituent la principale arme utilisée dans la lutte biologique contre les insectes ravageurs. Leur structure tri-dimensionnelle, établie par l'analyse de la diffraction des rayons X, révèle trois domaines principaux. Le domaine I, formé d'un groupe d'hélices, intervient probablement dans la formation d'un pore dans la membrane luminale des cellules intestinales des insectes sensibles. Les domaines II et III sont formés principalement de feuillets et semblent déterminer la spécificité de la toxine en interagissant avec des protéines réceptrices à la surface de ces membranes. Nous avons fabriqué des gènes chimériques par échange des régions codant pour …
Colloque
Bacillus thuringiensis accumule, lors de la sporulation, des inclusions cristallines composées de protéines ayant une activité insecticide sélective. Ces toxines agissent en formant des pores dans la membrane plasmique des cellules sensibles après s'être liées à des récepteurs spécifiques. La taille et la sélectivité ionique de ces pores ont été étudiées avec une technique d'imagerie vidéo permettant de mesurer le flux transmembranaire de différents solutés à partir des vitesses de gonflement osmotique des cellules Sf9, une lignée cellulaire issue du légionnaire d'automne Spodoptera frugiperda. Seules les toxines actives sur ces cellules en augmentent la perméabilité membranaire. La Cry1C permet la …
Colloque
Le mode d'action des toxines entomopathogènes du bacille de Thuringe demeure peu connu. Nous avons établi que parmi ces protéines, CrylC et CrylA(c), spécifiques aux lépidoptères, créent des canaux ioniques de 25 à 30 pS dans des membranes cellulaires de 350 à 600 pS dans des bicouches lipidiques planes, induisent une augmentation du calcium intracellulaire (100 à 600 nM) et dérégulent le pH intracellulaire des cellules de lépidoptères (Spodoptera frugiperda et Spodoptera exigua). Au moyen de la microscopie confocale, nous montrons que la CrylA(c) et la CrylC provoquent, dans différentes cellules de lépidoptères (CF-1, SF-9, UCR-SE-IA), des altérations structurales et …
