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Colloque
Les complications reliées au diabète sont souvent associées aux produits de glycation qui influenceraient la réponse contractile de certains types cellulaires. Ainsi, on tente de déterminer l’effet du glucose sur les propriétés mécaniques de la cellule et sur les mécanismes de signalisation reliés à la réponse contractile observée lors de l’activation du récepteur AT1. La rigidité cellulaire ainsi que la réponse contractile induite par AngII sont mesurés par microscopie à force atomique (AFM) sur des HEK-293 transfectées avec le récepteur AT1 et soumis à des concentrations de glucose de 5 et 30 mM pendant 7 jours. Les niveaux de relâche …
Colloque
L’activation de récepteurs membranaires entraîne généralement l’activation de cascades de signalisation cellulaires et d’événements moléculaires susceptibles de modifier l’état mécanique global de la cellule. Ces changements peuvent être associés à des fonctions cellulaires liées à des états physiologiques déterminés. Il est possible à partir de mesures de forces une cellule individuelle de quantifier les changements morphologiques et mécaniques associés à l’activation de récepteurs couplés aux protéines-G (GPCR) qui représentent une classe importante de cibles pharmacologiques. En combinant la mesure de force en temps réel avec la vidéomicroscopie à contraste de phase et confocale de cellules surexprimant l’actine-GFP, nous pouvons caractériser …
Colloque
L’activation de récepteurs membranaires entraîne généralement l’activation de cascades de signalisation cellulaires et d’événements moléculaires susceptibles de modifier la distribution de composantes cytosoliques d’une cellule. Il est possible à partir de mesures de résonnance des plasmons de surface (SPR) réalisées sur des couches cellulaires cultivées sur surface d’or, de mesurer des événements moléculaires se produisant au niveau de la membrane ou du corps cellulaire, ceci sans nécessiter l’utilisation de marqueurs fluorescents ou radioactifs. Dans l’optique d’une validation de cette nouvelle approche expérimentale, nous avons mesuré par SPR les réponses cellulaires en temps réel engendrées suite à l’activation de récepteurs de …
Colloque
Il a été montré par microscopie à épifluorescence que la phospholipase A2 (PLA2) attaque de façon spécifique les monocouches de dimyristoylphosphatidylcholine en formant des domaines de PLA2 à l'interface air-eau. Grainger et al., 1990, Biochim. Biophys. Acta 1023, 365-379; 1 1 6 de présenter, et 1992, Biochim. Biophys. Acta, 1106, 178-188) que les deux produits d'hydrolyse, l'acide palmitique et le lysophosphatidylcholine (lyso-PC). Pour vérifier cette hypothèse, nous avons utilisé des phospholipides synthétiques suivants: 1-palmitoyl, 2-caproyl-sn-3-phosphocholine (C16C6-PC) and 1-caproyl, 2-palmitoyl-sn-3-phosphocholine (C6C16-PC). L'hydrolyse de C16C6-PC produit un acide gras à courte chaîne (C6) soluble et un lyso-PC non soluble alors que l'hydrolyse …
Colloque
Il a été montré par microscopie à épifluorescence que la phospholipase A2 (PLA2) attaque de façon spécifique les monocouches de dimyristoylphosphatidylcholine en formant des domaines de PLA2 à l'interface air-eau. Grainger et al., 1990, Biochim. Biophys. Acta 1023, 365-379; 1 1 6 de présenter, et 1992, Biochim. Biophys. Acta, 1106, 178-188) que les deux produits d'hydrolyse, l'acide palmitique et le lysophosphatidylcholine (lyso-PC). Pour vérifier cette hypothèse, nous avons utilisé des phospholipides synthétiques suivants: 1-palmitoyl, 2-caproyl-sn-3-phosphocholine (C16C6-PC) and 1-caproyl, 2-palmitoyl-sn-3-phosphocholine (C6C16-PC). L'hydrolyse de C16C6-PC produit un acide gras à courte chaîne (C6) soluble et un lyso-PC non soluble alors que l'hydrolyse …
Colloque
Il a été montré par microscopie à épifluorescence que la phospholipase A2 (PLA2) attaque de façon spécifique les monocouches de dimyristoylphosphatidylcholine en formant des domaines de PLA2 à l'interface air-eau. Grainger et al., 1990, Biochim. Biophys. Acta 1023, 365-379; 1 1 6 de présenter, et 1992, Biochim. Biophys. Acta, 1106, 178-188) que les deux produits d'hydrolyse, l'acide palmitique et le lysophosphatidylcholine (lyso-PC). Pour vérifier cette hypothèse, nous avons utilisé des phospholipides synthétiques suivants: 1-palmitoyl, 2-caproyl-sn-3-phosphocholine (C16C6-PC) and 1-caproyl, 2-palmitoyl-sn-3-phosphocholine (C6C16-PC). L'hydrolyse de C16C6-PC produit un acide gras à courte chaîne (C6) soluble et un lyso-PC non soluble alors que l'hydrolyse …
Colloque
La phospholipase A2 (pla2) est une enzyme qui hydrolyse spécifiquement la chaîne grasse en position 2 des phospholipides. Suite à l'hydrolyse des chaînes monomoléculaires de phospholipides, la pla2 s'auto-inhibe en formant des domaines. Ces domaines ont été observés uniquement dans le cas de tels phospholipides permettant une coexistence des états physiques liquide et solide. Le mécanisme de cette auto-inhibition est encore inconnu mais on croit qu'une concentration locale élevée des produits d'hydrolyse est importante. Différentes évidences permettent de supposer que la pla2 a une grande affinité pour la charge négative de l'acide gras. Suite à sa liaison, la pla2 change-tant …
Colloque
La phospholipase A2 est une enzyme qui hydrolyse la chaîne grasse en position 2 des phospholipides. Ce processus peut être visualisé directement en utilisant la microscopie de fluorescence à l'interface air-eau. Il s'agit de marquer l'enzyme avec de la fluorescéine isothiocyanate et la monocouche de phospholipides avec une sonde fluorescente, i.e. un phospholipide dont la sulforhodamine est liée de façon covalente au niveau de la tête polaire. En changeant les filtres du microscope, on peut donc observer alternativement l'enzyme ou la monocouche de phospholipides. De plus, en utilisant un phospholipide saturé, il est possible de provoquer la formation de domaines …
Colloque
Le dégagement d'oxygène fonctionne selon un mécanisme à cinq étapes, le cycle des états-S. L'efficacité de ce fonctionnement est cependant diminuée par des "rats" (mises) qui empêchent la transition d'un état à l'autre. La présence de ces rats sur tous les états-S peut être déterminée par le dégagement d'O2 sous éclairs; cependant cette méthode ne permet pas de déterminer individuellement des rats pour chaque état-S. Ainsi, certains modèles ne ratifient pas ou peu les rats se produisent de façon égale (homogène) sur tous les états-S, alors que d'autres proposent une répartition inégale. Jusqu'à maintenant, il n'existait pas de méthode pour …
Colloque
Lorsque l'on mesure la fluorescence variable des organelles photosynthétiques sur une échelle de temps inférieure à 5 sec, on détecte une montée de fluorescence rapide du niveau 0 au niveau I, qui est suivie d'une montée lente mais plus importante du niveau I au niveau P. Nous avons soumis des thylacoïdes d'orge à l'inhibition au sulfate. Ce traitement qui inhibe sélectivement le dégagement d'oxygène des photosystèmes IIA (PSII) a donné lieu à une diminution de la montée de fluorescence au niveau P. La première montée 0-I est restée insensible à l'inhibition du dégagement d'oxygène par le sulfate. La comparaison des …
