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La réaction à l'épichlorhydrine comme agent bifonctionnel est largement utilisée pour la réticulation des polymères avec des applications industrielles. Il est bien connu le fait que l'épichlorydrine, en plus de former une réticulation via des ponts glycérol de type diether, génère aussi des produits secondaires (du glycérol) ainsi que des "greffons" de type monoéthers de glycérol et de type polyhydroxypropyle sur les chaînes polymériques. Les méthodes existantes permettent de suivre l'avancement de ces réactions de façon indirecte : par volume de gonflement (G. Hollinger, L.Kuniak and R. H. Marchessault, Biopolymers, 13, 879, 1974), dosage chimique de monoether glycerol (L. Kuniak …
L'hémoglobine, sans être une glycoprotéine, a la capacité de se glycosyler, générant des variantes de type HbA1a, HbA1b, HbA1c etc. L'hypothèse d'une reconnaissance des unités de glucose dans les polysaccharides de type polyglucose, nous a permis de mettre en évidence une haute sélectivité pour des structures présentant des unités de glucose sans par liaisons alpha-1,4-glucosidiques, toutefois sans aucune interaction avec d'autres polymères de type polyglucose comme la cellulose (liaisons de type beta-1,4-glucosidiques) ou le dextran (liaisons alpha-1,6-glucosidiques). Cette affinité sélective pour l'amylose réticulé (polymère réalisé dans notre laboratoire), nous a permis la séparation de l'hémoglobine, par chromatographie d'affinité en une …
La céruplasmine, l'oxydase plasmatique (EC 1.16.3.1) est une protéine multifonctionnelle avec des propriétés de piégeurs de radicaux libres oxygénés, limitant leurs effets potentiellement néfastes sur le myocarde. Les radicaux libres ont été générés par l'électrolyse d'un courant DC d'une solution Krebs-Henseleit, purgée, perfusant des cœurs de rats isolés. Plusieurs réacteurs biochimiques (lactate déshydrogénase, créatine kinase, aspartate aminotransférase, malonaldialdéhyde, Ca2+ et Mg2+) déterminés dans le cœur, ont confirmé la protection du myocarde par la CP. Le niveau des indicateurs provenant des cœurs perfusés avec la solution électrolysée et traités avec la CP a été préservé de 46 à 85 % selon …
L'amylose réticulé par traitement à l'épichlorhydrine a été récemment introduit comme matrice pour la libération contrôlée de médicaments. Les premiers résultats obtenus montrent que le temps de libération de substances actives diminue de façon non-linéaire avec l'augmentation du degré de réticulation. Ce comportement semble s'expliquer par la présence de liaisons interchaînes de type hydrogène OH...OH établies suite aux phénomènes liés à la compression. La présence de ces ponts hydrogène a été confirmée par spectroscopie infra-rouge sur des amyloses à divers degrés de réticulation variant entre 4 et 60%. Les quantités d'eau retenue par ces structures (en relation directe avec le …
La matrice à base d'amylose réticulée (CLA) a été récemment introduite pour la libération contrôlée de médicaments. La libération de théophylline (traceur) à partir de diverses matrices de CLA s'était avérée presque linéaire (qté libérée/temps) pour des temps de libération variant en fonction du degré de réticulation. Les meilleurs résultats de libération (55 heures) ont été obtenus à partir de la matrice CLA (1% p/p éthylène glycol diméthacrylate). L'analyse cinétique de la libération a indiqué une libération d'un type anomalique, où la quantité de traceur introduite (jusqu'à 60% p/p de traceur) sans varier le temps de libération totale. La force …
Il semble que la Céruloplasmine (EC 1.16.3.1) épure les radicaux libres oxygénés potentiellement néfastes sur le myocarde. Les radicaux libres sont générés par l'électrolyse (10mA courant DC) d'une solution Krebs-Henseleit, perfusant des coeurs de rats isolés. La Céruloplasmine assure une protection dose dépendante contre les radicaux libres qui peuvent causer le déclin du débit coronaire et de la pression ventriculaire et abolie l'augmentation de la pression diastolique ventriculaire gauche (indice de défaillance cardiaque). Pour la première fois, il a été mis en évidence que la Céruloplasmine réduit de façon significative l'augmentation de la libération de noradrénaline du coeur de rat …
L'amylose réticulée, (CLA), récemment obtenue est formée par des chaînes d'unités répétitives de glucose, assemblées dans des structures tridimensionnelles obtenues par la réticulation à l'épichlorhydrine. L'hémoglobine (Hb) n'est pas une glycoprotéine, mais dans le cas du diabète, elle est facilement glycosylée par des réactions non enzymatiques générant divers types d'hémoglobines glycosylées (HbA1a, HbA1b, HbA1c) selon le degré d'avancement de la réaction de glycosylation. À partir de la facilité de l'Hb à reconnaître et à réagir avec le glucose, nous avons réalisé une étude d'interaction Hb-dérivés de polyglucoses. L'hypothèse est que le glucose étant enchaîné dans la structure d'amylose réticulé, peut …
Le facteur X est une glycoprotéine plasmatique qui joue un rôle important dans la coagulation sanguine. Activé par l'action protéolytique de certaines enzymes, dont le venin de vipère, il devient une sérine-protéase, le facteur X activé (FXa) (EC 3.4.21.6), catalysant avec une haute spécificité l'hydrolyse de la prothrombine du côté carboxyl de l'arginine de la séquence peptidique Ile-Glu-Gly-Arg de la thrombine. Trois peptides de synthèse (Glu-Gly-Arg-p-NA, Gly-Arg-p-NA et Leu-Gly-Arg-p-NA) ont été immobilisés sur support d'agarose activé au bromure de cyanogène (BrCN-Sepharose 4BTM) et le FXa purifié à partir du plasma bovin présente une activité protéolytique sur ces substrats chromogéniques immobilisés …
On prépare des membranes AE-PVA (dérivé biocompatible récemment réalisé) par la mise en solution du polymère dans un tampon phosphate chauffé jusqu'à solubilisation. Par la suite, on laisse la solution refroidir à la température de la pièce, on y ajoute la protéine à immobiliser et on coule ce mélange sur une feuille d'acétate fixée sur une plaque de verre. On peut ajouter l'agent d'immobilisation avant le coulage ou après le séchage de la membrane (évaporation de l'eau à 25ºC). Dans le deuxième cas, la réticulation s'effectue par simple trempage dans une solution contenant l'agent d'immobilisation de glutaraldéhyde, le carbodiimide et …
L'amylose réticulé (CLA) obtenu par traitement à l'épichlorohydrine est un nouveau concept de matrice à libération lente et contrôlée de médicament. La libération de la théophylline à partir de comprimés d'amylose réticulé variable (obtenu en variant le rapport épichlorohydrine / amylose) est avérée presque linéaire en fonction du temps. Dans le cas des comprimés basés sur l'amylose faiblement réticulée (CLA-7.5) et contenant jusqu'à 20% de théophylline (w/w), la libération est effective pour une période de 15 heures. Cependant, pour des degrés de réticulation plus élevés (CLA-12 et CLA-15), la libération à partir de 12 heures est attribuée à une érosion …