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Colloque
La phospholipase A2 (PLA2) est une enzyme hydrosoluble d'environ 14 kDa qui hydrolyse la liaison ester en position SN-2 des glycérophospholipides pour former un lysolipide et un acide gras. Son activité est principalement modulée par les caractéristiques physico-chimiques des membranes. La mélittine est un polypeptide amphiphile de 26 acides aminés (2,8 kDa) organisé en hélice alpha imparfaite dû à la présence d'un coude bêta. Des données de la littérature suggèrent qu'il existe un synergisme entre la PLA2 et la mélittine. En effet, il a été observé que l'activité enzymatique de la PLA2 augmente beaucoup en présence de mélittine. On ne …
Colloque
Différentes classes de phospholipases A2 (PLA2), qui hydrolysent spécifiquement l'acide gras en position sn-2 des phospholipides membranaires, sont présentes chez diverses cellules de mammifères. Au moins deux isoformes de PLA2, différentes de toutes les PLA2 connues jusqu'à maintenant, ont récemment été identifiées chez les cellules de l'épithelium pigmentaire rétinien (EPR) bovin. Nous avons démontré, chez les cellules de l'EPR humain, une activité spécifique des PLA2 jusqu'à 100 fois plus élevée que celle de l'EPR bovin. Une telle activité enzymatique suggère une grande probabilité de l'implication des PLA2 de l'EPR humain au niveau de certaines pathologies rétiniennes, comparativement à leurs homologues …
Colloque
La protéine acide fibrillaire de la glie (GFAP) fait partie de la catégorie des filaments intermédiaires. Cette protéine est habituellement localisée au niveau des astrocytes. Toutefois, lors de blessures ou de maladies de l'œil, elle est exprimée en grande quantité dans les cellules de Müller de la rétine. L'objectif de notre travail est d'étudier la régulation du gène de la GFAP dans des conditions normales et pathologiques de la rétine. Nous avons mis au point une méthode de culture des cellules de Müller chez l'humain et le rat. Le phénotype cellulaire a été confirmé par l'utilisation d'anticorps spécifiques à ce …
Colloque
Les intégrines forment une famille de récepteur de la matrice extracellulaire (MEC) et ont un rôle majeur à jouer dans les processus de cicatrication et de migration ainsi que dans le potentiel métastatique de certaines cellules cancéreuses. Plusieurs études d'immunocytochimies et d'immunohistochimies ont démontré que le patron d'expression des intégrines a4b1 et a5b1, deux récepteurs de la fibronectine, était modulé par certains facteurs de croissance et agents mitotiques. Nous avons vérifié l'influence de l'EGF, du bFGF, de l'insuline, du PMA et de l'IBMX sur l'activité transcriptionnelle des gènes des sous-unités a4 et a5 de ces intégrines par transfection transitoire à …
Colloque
Lors d'une blessure à l'épithélium cornéen, la plaie se recouvre de fibronectine suite à une augmentation de la synthèse de cette molécule d'adhésion par les cellules épithéliales et des kératocytes stromaux. La fibronectine possède de nombreux sites de liaison reconnus par des récepteurs cellulaires, incluant, entre autres, les intégrines a4B1 et a5B1. Les intégrines sont formées de l'association d'une sous-unité a, responsable de la spécificité du ligand, et d'une sous-unité B. Considérant leur rôle bien connu dans l'adhésion, la migration et la différentiation cellulaire, ces intégrines pourraient être impliquées dans le mécanisme de cicatrisation de l'épithélium cornéen. Des cultures de …
Colloque
Le signal lumineux capté par la rhodopsine est rapidement amplifié. D'abord, la rhodopsine active près de 500 protéines G (Gt) Lors de son activation par la rhodopsine, la Gat échange son GDP pour un GTP, ce qui diminue son affinité pour la rhodopsine et pour sa propre sous unité bg. La Gat activée se lie alors au sous unités g de la phosphodiestérase (PDE), rendant cette dernière capable d'hydrolyser environ 1 000 GMPc. La concentration de GMPc chute alors rapidement (200 msec) et il s'en suit une hyperpolarisation des bâtonnets rétiniens. La désactivation de ce processus a lieu en 300 …
Colloque
La protéine transmembranaire d'origine bactérienne bactériorhodopsine possède des propriétés photochimiques exceptionnelles. Suite à l'absorption d'un photon lumineux par son chromophore, la bactériorhodopsine entre dans un photocycle qui mène éventuellement au pompage d'un proton d'un côté à l'autre de la membrane. In vitro, cette translocation de protons contribue à former un gradient de pH de part et d'autre de la membrane, lequel permettra ensuite la formation d'ATP grâce aux ATP synthétases présentes dans la membrane. Depuis quelques années déjà, on pense pouvoir se servir des caractéristiques de cette protéine afin de construire un photodétecteur biologique ou d'autres éléments d'optœlectronique à base …
Colloque
Les segments externes des bâtonnets de rétines bovines contiennent le pigment visuel appelé rhodopsine qui, suite à l'absorption d'un photon, subit un changement conformationnel qui lui permet de lier et d'activer la transducine (T). T appartient à la superfamille des protéines G liant et hydrolysant le GTP. Cette activation a lieu au niveau de la sous-unité α de la transducine (Tα) suite au remplacement du GDP par un GTP. Cette sous-unité se sépare ensuite des sous-unités βγ (Tβγ) et migre jusqu'à la phosphodiestérase (PDE) pour l'activer. Toutefois, on ne sait toujours pas si Tα sous sa forme active (Tα-GTP) diffuse …
Colloque
Il a été montré par microscopie à épifluorescence que la phospholipase A2 (PLA2) attaque de façon spécifique les monocouches de dimyristoylphosphatidylcholine en formant des domaines de PLA2 à l'interface air-eau. Grainger et al., 1990, Biochim. Biophys. Acta 1023, 365-379; 1 1 6 de présenter, et 1992, Biochim. Biophys. Acta, 1106, 178-188) que les deux produits d'hydrolyse, l'acide palmitique et le lysophosphatidylcholine (lyso-PC). Pour vérifier cette hypothèse, nous avons utilisé des phospholipides synthétiques suivants: 1-palmitoyl, 2-caproyl-sn-3-phosphocholine (C16C6-PC) and 1-caproyl, 2-palmitoyl-sn-3-phosphocholine (C6C16-PC). L'hydrolyse de C16C6-PC produit un acide gras à courte chaîne (C6) soluble et un lyso-PC non soluble alors que l'hydrolyse …
Colloque
Les photorécepteurs visuels (PV) contiennent des quantités considérables d'acides gras polyinsaturés (50%) qui se mélangent avec les autres phospholipides saturés. On peut supposer qu'un tel niveau d'insaturation aide à maintenir les membranes des PV dans un état de fluidité élevée permettant une grande mobilité moléculaire. Cependant, il est possible que les phospholipides insaturés forment des séparations de phases en présence de phospholipides saturés, ce qui pourrait avoir des répercussions importantes sur le mécanisme de transduction visuelle. Afin de vérifier cette hypothèse, nous avons effectué des mesures de fluidité membranaire par anisotropie de fluorescence avec des vésicules lipidiques composées de diverses …
