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Colloque
La réaction hypersensible de Nicotiana tabacum cv. Xanthi-nc au virus de la mosaïque du tabac (TMV) et la résultante de la formation de lésions locales nécrotiques. Les protéines reliées à la pathogénèse (pathogenesis-related ou PR) furent associées à cette réaction. Ces protéines sont stimulées par un stress pathogénique et elles s'accumulent à l'extérieur de la cellule. Certaines protéines PR ont pour fonction de dégrader les β-1,3-glucanes, des composantes de la paroi fongique et de la callose végétale. Ces enzymes furent détectées après l'électrophorèse en gel de polyacrylamide. Nous avons utilisés différents substrats riches en β-1,3-glucanes: laminarine, lichenan et pachyman. Les …
Colloque
Plusieurs centaines d'isolats bactériens ont été évalués pour leur activité bactérilytique envers Micrococcus luteus en incorporant des cellules ou des parois de Micrococcus dans le milieu nutritif gélosé. Un Bacillus a ainsi été sélectionné par l'importance de sa zone de lyse. Une banque génomique de cette souche a été construite dans le vecteur pTZ18R. De cette banque, plus de 800 colonies ont été analysées pour leur activité lytique envers Micrococcus par l'électrophorèse des extraits de cellules autolysées. Une activité lytique a été détectée correspondant à l'activité lytique de 27 kDa. Le retour à la lecture du cadre ouvert a permis …
Colloque
En production végétale, le diagnostic précoce des infections virales s'avère prioritaire, particulièrement chez les espèces multipliées végétativement. Depuis quelques années, le développement et l'utilisation de sondes moléculaires par le biais des techniques de génie génétique a connu une évolution rapide. Des plasmides contenant divers portions d'acides nucléiques spécifiques aux virus Y et S de la pomme de terre ont été obtenus. Des essais visant l'hybridation moléculaire de ces plasmides recombinants avec des virions purifiés et des extraits végétaux infectés ont été réalisés. Diverses approches alternatives à l'utilisation d'isotopes radioactifs ont été comparées sur la base de leur sensibilité et de …
Colloque
L'interaction des cotylédons de concombre avec le virus de la mosaïque du tabac (TMV) est caractérisée par une localisation virale sans nécrose dans les lésions amyflaires. Cette nécrose est, le plus, très lentement par les conditions de luminosité. Ainsi, l'objectif de ce travail a été une étude comparative de cette interaction dans une photopériode de 24 heures et à l'obscurité continue. Les plants infectés avec le TMV (2 µl TM) ont été placés à l'obscurité continue ou à des conditions normales d'éclairage. Le développement des lésions locales nécrotiques à l'obscurité continue est accompagné d'une inhibition de l'induction des protéines reliées …
Colloque
Le flétrissement bactérien, causé par C. michiganense pv sepedonicum, est l'une des maladies les plus importantes affectant la pomme de terre en Amérique du Nord. Dans l'optique de l'acquisition d'une résistance à la maladie par la transformation génétique via l'aide de protéines antimicrobiennes, nous avons d'abord étudié certaines activités lytiques envers les parois de C. michiganense pv sepedonicum. L'enzyme a type autolysine, de masse moléculaire d'environ 25kda, a été caractérisée chez un Bacillus sp. Cette autolysine exerce une activité lytique vis à vis les parois du pathogène. Le pH optimal de l'activité lytique de l'autolysine se trouve à la force …
Colloque
Un inhibiteur de réplication virale identifié dans le milieu d'incubation de protoplastes de Nicotiana inoculés avec le virus de la mosaïque du tabac (TMV), et associé aux espèces hypersensibles, partage des caractéristiques communes avec certaines des protéines accumulées dans les espaces extracellulaires suite à un stress (bPR). Ces caractéristiques sont: poids moléculaire, conditions et lien d'accumulation, et association à la réaction d'hypersensibilité. Nous discuterons des résultats préliminaires visant à établir plus fermement la correspondance entre ces protéines, notamment en déterminant les produits et évaluant le diamètre et nombre de lésions locales suite à une inoculation concurrente de TMV. Déjà des …
Colloque
Les pathogènes fongiques et bactériens sont à l'origine d'un nombre important de maladies végétales. L'hydrolyse des constituants pariétaux bactériens et fongiques par des enzymes d'activités de type lysozyme-chitinase affecte l'intégrité cellulaire de ces microorganismes et s'avère souvent délétère pour eux. La mise au point de conditions permettant la séparation électrophorétique de protéines basiques en gel de polyacrylamide et le transfert de ces protéines à travers une suspension bactérienne de Micrococcus lysodeikticus incluse dans une matrice de polyacrylamide, nous a permis de mettre en évidence la présence d'activités hydrolytiques de type lysozyme-chitinase dans les extraits clarifiés de nombreuses espèces phanérogamiques. La …
Colloque
Chez le tabac, la résistance par hypersensibilité aux virus est accompagnée par la production de protéines extracellulaires, bien étudiées, nommées protéines du PR. Ces protéines, même si leurs fonctions exactes nous sont encore inconnues, semblent associées aux mécanismes de restriction virale. Nous avons inoculé plusieurs cultivars de pomme de terre avec des concentrations élevées du virus de la mosaïque du tabac pour provoquer une réaction d'hypersensibilité. Une stimulation de la production de protéines extracellulaires a été observée chez les plants infectés. L'examen des profils d'électrophorèse en conditions natives a montré que différents cultivars parmi les mêmes protéines se groupent en …
Colloque
Lors du processus de germination, les semences relâchent plusieurs substances dans le milieu extérieur. Du point de vue phytopathologique, ce phénomène pourrait s'avérer important au niveau de la protection des semences contre les microorganismes du sol. Au cours de nos expériences, deux cultivars de radis ont été utilisés ("Etniceland" et "Flamant"). Les graines ont été mises à germer sur un support d'agarose. Les substances libérées dans l'agarose après 18-24 heures d'incubation ont été récupérées par un procédé d'élution à l'eau déionisée lyophilisées. Les protéines de cette fraction ont été séparées par gel de polyacrylamide et l'activité enzymatique bien que des …
Colloque
L'étude des modifications protéiques lors de la réaction d'hypersensibilité a permis la détection de neuf nouvelles protéines basiques solubles qui s'accumulent dans le fluide intercellulaire de tissus stressés de plantes de Nicotiana hypersensibles. Ces protéines partagent plusieurs caractéristiques des protéines acides impliquées dans l'hypersensibilité et semblent intervenir dans les mécanismes cellulaires de résistance aux stress. Certaines des protéines C et D ont des fonctions identifiées. Plusieurs hypothèses concernant le rôle probable des protéines C et D dans les mécanismes de défense ou de rééquilibre physiologique suite au stress sont énoncées.
