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Colloque
Les changements ultrastructuraux observés dans les myocytes lors de l'ischémie cardiaque nous ont poussés à croire qu'un dérangement des protéines cytosquelettiques pouvait être à l'origine de la perte de contractilité. Par exemple, il est connu que l'arrangement cellulaire de la vinculine est perturbé par l'ischémie. À l'aide d'un appareil à perfusion de Langendorff, nous avons étudié l'effet de l'ischémie cardiaque ainsi que de la reperfusion avec et sans calcium sur la distribution de la desmine, constituant majeur des filaments intermédiaires ainsi que sur celle des desmoplakines, protéines principales des desmosomes. Les caractéristiques principales de ces tissus ischémiques étaient la perte …
Colloque
La dystrophine est une protéine géante (M~ 427,000) qui est le produit du gène du locus de la dystrophie musculaire de type Duchenne (DMD) et Becker (BMD). On croit que cette protéine est associée au cytosquelette membranaire. Les objectifs de notre étude étaient: 1) de développer un essai immunologique rapide et quantitatif pour la dystrophine; 2) de déterminer si le contenu cellulaire en dystrophine varie selon le type de fibre musculaire. Des homogénats totaux de soleus (SOL: contraction lente, fibres de type I) et de vasteus superficiel latéral (SVL: contraction rapide, fibres de type II) ont été résolus par électrophorèse …
Colloque
La littérature scientifique a déjà décrit une perte majeure d'intégrité structurale et de contractilité pour les cardiomyocytes après une ischémie. Nous avons émis l'hypothèse que ces lésions cellulaires étaient dues à une altération des protéines cytosquelettiques. L'objectif fut donc d'étudier la distribution de deux protéines, la desmine (filaments intermédiaires) et la tubuline (microtubules) par microscopie électronique à transmission à haute amplification spécifique sur des cœurs ayant subi une ischémie de 15 minutes suivie d'une reperfusion de 20 minutes (perfusion de Krebs) avec et sans Ca2+. L'analyse des résultats démontre une perte de desmine dans la région subsarcolemmale au niveau des …
Colloque
Nous avons effectué la purification partielle d'une polygalacturonase (PG) sécrétée par le FORL en milieu de culture inducteur. Cette purification a été atteinte après chromatographie sur CM-cellulose suivie d'une électrophorèse sur gel de polyacrylamide avec SDS. L'activité de la PG a été détectée dès le gel, et à la superposition d'un second gel de pectate-agarose coloré avec le rouge de ruthénium. L'élution de la PG à partir des bandes qui ont été découpées du gel, a permis d'obtenir une quantité minimale (60 à 100 µg) de l'antigène nécessaire pour l'immunisation des lapins. Le sérum, récolté après 31 jours, a été …
Colloque
IFAPA-400 est une protéine cytosquelettique de très haut poids moléculaire exprimée spécifiquement dans les tissus myogéniques et neurogéniques de l'embryon de poulet. Utilisant l'anticorps monoclonal F51H2, nous avons observé sa disparition progressive des cellules musculaires et nerveuses dès les premières manifestations de cytodifférenciation terminale. Ce patron d'expression n'est cependant pas absolu puisque nous avons récemment mis IFAPA-400 en évidence dans les cellules musculaires lisses de l'aorte chez l'adulte. Par immunodétection sur des segments congénitaux de l'aorte adulte, nous avons réalisé qu'IFAPA-400 est exprimée très fortement dans les cellules musculaires lisses de l'aorte à sa sortie du cœur et que son …
Colloque
Les myofibrilles des cellules musculaires contiennent un système cytosquelettique élaboré, subdivisé en domaine endo- et exosarcomériques. Nous avons entrepris la caractérisation des protéines cytosquelettiques des myofibrilles isolées des muscles cardiaques, soleus (SOL) et vastus lateralis (VSL) du rat. Les myofibrilles sont soumises à des extractions successives dans les tampons à haute teneur en sel contenant du détergent. Les résidus cytosquelettiques sont solubilisés dans l'urée et soumis à l'analyse électrophorétique en gels SDS-polyacrylamide (de 7 à 15%). Les résultats se résument ainsi. Une protéine de haute Mr (B1: ~500 x 10^3 D) est très abondante dans les cytosquelettes (CSK) des trois …
Colloque
Les myofibrilles des cellules musculaires contiennent un système cytosquelettique élaboré, subdivisé en domaine endo- et exosarcomériques. Nous avons entrepris la caractérisation des protéines cytosquelettiques des myofibrilles isolées des muscles cardiaques, soleus (SOL) et vastus lateralis (VSL) du rat. Les myofibrilles sont soumises à des extractions successives dans les tampons à haute teneur en sel contenant du détergent. Les résidus cytosquelettiques sont solubilisés dans l'urée et soumis à l'analyse électrophorétique en gels SDS-polyacrylamide (de 7 à 15%). Les résultats se résument ainsi. Une protéine de haute Mr (B1: ~500 x 10^3 D) est très abondante dans les cytosquelettes (CSK) des trois …
Colloque
Les myofibrilles des cellules musculaires contiennent un système cytosquelettique élaboré, subdivisé en domaine endo- et exosarcomériques. Nous avons entrepris la caractérisation des protéines cytosquelettiques des myofibrilles isolées des muscles cardiaques, soleus (SOL) et vastus lateralis (VSL) du rat. Les myofibrilles sont soumises à des extractions successives dans les tampons à haute teneur en sel contenant du détergent. Les résidus cytosquelettiques sont solubilisés dans l'urée et soumis à l'analyse électrophorétique en gels SDS-polyacrylamide (de 7 à 15%). Les résultats se résument ainsi. Une protéine de haute Mr (B1: ~500 x 10^3 D) est très abondante dans les cytosquelettes (CSK) des trois …
Colloque
Les protéines associées à l'actine (PAA) ont été peu étudiées jusqu'à maintenant chez les plantes vasculaires. Le but de ce projet, qui est d'identifier et de caractériser des PAA chez ce groupe végétal, a permis de montrer la présence de protéines apparentées aux sous-unités alpha et beta de la spectrine des globules rouges humains au niveau du système membranaire de la tomate (Lycopersicon esculentum L.). Les masses moléculaires de ces deux protéines sont d'environ 240 kD et 220 kD, ce qui correspond respectivement aux masses des sous-unités alpha et beta de la spectrine. De plus, des techniques de transfert électrophorétique …
Colloque
Les données sur l'organisation spatiale des microtubules (MTs) dans les muscles squelettiques proviennent d'observations en microscope électronique avec des sections enrobées dans du plastique. Un des problèmes inhérents à cette approche est la difficulté d'identifier les MTs au travers des myofibrilles contractées. Notre objectif était de déterminer l'organisation spatiale des MTs dans les fibres musculaires de rat adulte à l'aide de la technique d'immunofluorescence en microscopie optique. Les muscles vastus lateralis superficiel (SVL) et soleus (SOL) ont été fixés et enrobés dans le polyéthylène glycol. Des sections (1-2 µm) ont été incubées avec un anticorps monoclonal (DM 1A) spécifique à …
