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Colloque
Le facteur natriurétique des oreillettes (ANF) inhibe la production d'aldostérone en se liant à un récepteur spécifique dans le cortex surrénalien de boeuf. Le diurétique amiloride potentialise l'effet biologique de l'ANF dans la surrénale. Afin d'évaluer le mécanisme moléculaire de cette interaction, nous avons étudié l'effet de l'amiloride sur les caractéristiques de liaison de l'ANF et son effet sur les propriétés hydrodynamiques du récepteur de l'ANF dans la zone glomérulosa. L'amiloride augmente de 2-3 fois la liaison de 125I-ANF en augmentant la proportion des sites de haute affinité. Le profil d'élution du complexe 125I-ANF-récepteur solubilisés en chromatographie d'exclusion stérique montre …
Colloque
Le facteur natriurétique des oreillettes (ANF) inhibe de façon très puissante la production d'aldostérone dans les cellules de zona glomerulosa de la surrénale de boeuf. Cette action est médiée par un récepteur membranaire spécifique de haute affinité que nous avons identifié et caractérisé pharmacologiquement. Nous décrivons ici la solubilisation et la caractérisation des propriétés physico-chimiques du récepteur de l'ANF dans le cortex surrénalien. Le récepteur a été solubilisé avec le détergent non-ionique digitonine/glucoside. Les propriétés hydrodynamiques du récepteur solubilisé ont été déterminées par filtration sur gel et centrifugation sur gradient de sucrose. Les caractéristiques moléculaires du récepteur solubilisé sont: rayon …
Colloque
Nous avions rapporté la présence des récepteurs de AII à densité très élevée (1 pmole/mg de protéine) dans le cortex surrénalien en utilisant un nouvel antagoniste lié [Sar1, Ile8] AII marqué avec 125I (SARIL 125) (Mol. Pharm. 26, 498, 1984). Dans le but de purifier ces récepteurs, les membranes de cortex surrénalien de bœuf marquées par SARIL 125 sont solubilisées avec de l'octylglucoside à 40 mM pH8. La préparation soluble est d'abord délipidifiée sur cartouche Accell (Waters). La chromatographie sur HPLC avec de l'hydroxyapatite en colonne (Matrex) nous a permis d'exclure les protéines qui lient le SARIL 125 à 25 …
Colloque
Nous avons récemment identifié un nouveau peptide analogue au facteur natriurétique de l'oreillette dans la médullo-surrénale bovine. Ce nouveau facteur (FISA) est capable d'inhiber la sécrétion d'aldostérone des cellules de la zone glomérulosa. Afin de savoir si le FISA pouvait être produit par les cellules chromaffines bovines en culture, leur contenu peptidique est extrait sur cartouche Sep-Pak puis les formes de haut et de bas poids moléculaires sont séparées par chromatographie liquide d'exclusion stérique à haute performance. Le contenu moyen du FISA est de 150 fmole/5 X106 cellules chromaffines. Le prétraitement des cellules chromaffines avec 10 uM dexaméthasone ou 0.1 …
