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La méthode d’auto-assemblage permet de concevoir des peaux reconstruites bilamellaires (épiderme/derme) autologues par la capacité des fibroblastes dermiques à produire et à assembler leur propre matrice extracellulaire en présence d’acide ascorbique. Bien que présentant de bonnes propriétés élastiques, ce modèlepossède peu ou pas de réseau de fibres élastiques matures. Le but de ce travail était donc de développer un substitut cutané in vitro par génie tissulaire permettant d’étudier la maturation et l'organisation du réseau de fibres élastiques. Différents substituts ont été reconstruits en utilisant l’approche d’auto-assemblage du LOEX (Figure 1). L’élastogénèse est induit en activant la voie de l’Insulin-like growth …
La Dual Leucine zipper bearing Kinase (DLK), est une Mitogen-Activated Protein triple Kinase exprimée tardivement lors de la différenciation des cellules épidermiques de la peau normale humaine. Cette expression tardive nuit à son étude dans les modèles classiques de culture cellulaire (monocouche) puisqu’elle y est peu abondante. Elle est toutefois présente dans les peaux reconstruites humaines (PRH) produites dans notre laboratoire. Les travaux présentés ici visaient à développer un modèle de PRH sous-exprimant DLK afin de mieux saisir son rôle dans la différenciation des cellules épidermiques. MÉTHODE: Des PRHs ont été exposées à un vecteur lentiviral contenant une séquence d’ARN …
Les pathologies de l’endothélium cornéen, incluant la dystrophie de Fuchs et la kératopathie du pseudophaque, sont responsables de 42% des 40,000 transplantations cornéennes réalisées chaque année en Amérique du Nord. L’évolution naturelle de cette maladie résulte en une cécité progressive et douloureuse pour laquelle il n’existait jusqu’à présent qu’un seul traitement, le remplacement pleine épaisseur de la cornée. Or, cette technique s’accompagne d’importants effets secondaires et complications. Le groupe BioFemtoVision Canada est formé de six équipes ayant uni leurs efforts pour aborder de façon efficace et complémentaire la problématique de la transplantation cornéenne pour endothéliopathie au Canada. Notre but est …
La peau est constituée de deux couches : le derme et l'épiderme. Le derme, qui fait office de tissu de soutien, est responsable des propriétés mécaniques de la peau. Il est constitué en majeure partie de fibroblastes et des éléments de la matrice extracellulaire dont le collagène et les fibres élastiques, qui procurent résistance et élasticité à la peau. Le but de cette étude est d'analyser les propriétés mécaniques des peaux reconstruites par la méthode d'auto-assemblage. Cette dernière consiste en la superposition de feuillets de fibroblastes humains cultivés en présence d'acide ascorbique sur lesquels des kératinocytes humains sont déposés et …
Les kératines (K) sont les filaments intermédiaires présents dans le cytoplasme de toutes les cellules épithéliales. Leur expression est régulée de façon spécifique selon le tissu et le stade de différenciation. Dans la peau humaine, les kératinocytes de la couche basale de l'épiderme et de la gaine folliculaire externe des follicules pileux expriment principalement les kératines K5 et K14. Une sous-population de cellules basales expriment aussi la K19. Cette dernière est unique car contrairement aux autres protéines de la famille des filaments intermédiaires, elle possède une extrémité C-terminale très courte. Étant donné que les cellules exprimant la K19 sont localisées …
Nous avons récemment observé par microscopie électronique que coupes congelées immunoréactives, l'internalisation dépendante sur ligand du récepteur de prolactine (prlR) à l'intérieur des vésicules à faible capacité (ELV, "electron lucent vesicles"). Comme du marquage a été observé à l'intérieur de quelques ELVs étaient juxtaposées au canalicule biliaire, on a essayé d'évaluer une route transcytotique probable par des études de double-marquage. En employant le récepteur de mannose-6-phosphate (MRP) comme élément marquant endosomes nous avons remarqué quatre catégories de ELVs: MRP+/prlR+, MRP+/prlR-, MRP-/prlR+, et MRP-/prlR-. Il est apparu que le marquage prlR était aussi immunoréactif pour MRP. Dans les cellules hépatobiliaires avec …
Le cancer du foie donne lieu à plusieurs types de carcinomes dont les deux majeurs sont les hépatocarcinomes (Hepcs) et les cholangiocarcinomes (CCOs). Nous avons récemment démontré que lors de l'expression différentielle de marqueurs métaboliques, de cytokératines et d'éléments exposés en surface, les cellules du foie de rat de 12e jour fœtal présentent les propriétés de précurseurs bipotentiels de l'hépatocyte et des ductules biliaires (Germain, L. et coll., 48:4909-4918, 1988). Des analyses de lignées de carcinomes dérivées de ces deux types de précurseurs permettent de conclure que les cellules engagées vers les hépatocytes tandis que les CCOs dérivent plutôt de …
La culture de kératinocytes in vitro est utilisée pour le traitement des grands brûlés. La rapidité de croissance des kératinocytes est un facteur important afin de diminuer le temps entre l'arrivée du patient et la première greffe d'équivalents épidermiques. L'optimisation des conditions de cultures de kératinocytes est donc primordiale. La prolifération cellulaire peut être évaluée de façon objective en mesurant, par la cytométrie en flux, le pourcentage de kératinocytes en phase S à l'aide du bromodésoxyuridine et via l'iodure de propidium. Le but du travail était d'optimiser cette technique d'analyse de l'ADN et de comparer les pourcentages de kératinocytes en …