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Communication
Dans ce projet, nous proposons de développer différentes stratégies afin de préparer des immunoglobulines polyclonales humaines spécifiques à un antigène par culture in vitro de lymphocytes B humains spécifiques. Ces immunoglobulines polyclonales spécifiques pourraient représenter une source alternative aux préparations existantes d’immunoglobulines hyperimmunes isolées à partir du plasma de donneurs de sang. Pour ce faire, nous testons de nouvelles stratégies pour l’isolation de lymphocytes B spécifiques à un antigène. Tout d’abord, des essais de sélection de cellules B en utilisant des billes magnétiques couplées à l’antigène sont effectués pour isoler une population de cellules B spécifiques à cet antigène. Nous …
Colloque
Il est maintenant connu que les plasmocytes primaires et les hybrides de cellules B requièrent la présence d'IL-6 pour leur prolifération in vitro. Nous avons observé précédemment qu'une inhibition de synthèse protéique par la cycloheximide dans une lignée d'hybride dépendante de l'IL-6 produisait une dégradation rapide des mRNAs et actine et s'accompagnait d'une perte de viabilité des cellules in vitro. Ce phénomène semble être relié à la sensibilité à l'IL-6 puisque nous avons observé que les cellules IL-6 indépendantes en absence d'IL-6 montraient une sensibilité accrue à la cycloheximide. Dans le but de mieux caractériser ces effets, des hybrides de …
Colloque
Nous avons précédemment décrit la caractérisation préliminaire d'une monokine différente du TNF alpha et capable d'inhiber la prolifération d'hybridomes préparés à partir de cellules de rate de souris. L'analyse des anticorps produits par les cellules sensibles a révélé que la lyse sensible à ce facteur est dérivée d'un lymphocyte B. Des expériences additionnelles de caractérisation biochimique ont montré que ce facteur est distinct du transforming growth factor (TGF-β) et de l'IFNβ, résistant à l'inactivation par des agents dénaturants tels que l'urée et la guanidine-HCL mais sensible au 2-mercaptoéthanol. Ces résultats suggèrent que ce facteur pourrait constituer un nouveau type d'interleukine …
Colloque
Les plasmocytomes primaires et les hybridomes de cellules B expriment un gène myc dérégulé suite à une translocation dans le locus des gènes d'Ig et requièrent la présence de l'IL 6 pour leur prolifération in vitro. La découverte récente que l'IL 6 peut activer l'expression des gènes d'Ig dans les lymphocytes B a suggéré un rôle de l'IL 6 dans le contrôle de l'expression de l'oncogène myc transloqué dans ce type de cellules. Nous avons étudié l'effet de l'IL 6 sur le niveau d'expression de l'oncogène myc dans une lignée d'hybridome dépendante de l'IL 6. Les résultats obtenus n'ont pas …
Colloque
Il est maintenant bien établi que la fusion entre une cellule tumorale et une cellule normale peut produire dans la cellule hybridée une suppression du phénotype tumoral du parent transformé. À cet égard, des travaux récents de ce laboratoire ont montré que la sensibilité à l'IL1-6 de myélome murin était réactivée suite à la fusion avec des lymphocytes B normaux. Dans ces expériences, nous avons observé que la croissance de certains hybridomes était inhibée par la présence d'un facteur (facteur RO) présent dans le milieu conditionné par des cellules de type monocyte-macrophage. En utilisant une lignée cellulaire sensible au facteur …
Colloque
Les hybridomes de lymphocytes-B sont maintenant couramment utilisés pour produire des anticorps monoclonaux (AcMo). Nous avons mis au point une méthode de sélection qui permet d'isoler des variants d'hybridomes sécrétant des Ac de plus haute avidité. Cette méthode est basée sur le fait que les hybridomes expriment une certaine quantité de l'Ac monoclonal sous une forme membranaire, ce qui leur permet de se lier à l'antigène (Ag) immobilisé. En forçant le détachement des hybridomes de l'Ag, jusqu'à ce qu'un variant perd les variants possédant une avidité accrue pour l'Ag. Jusqu'à présent, la méthode a été testée avec un hybridome sécrétant …
Colloque
Nous avons étudié l'effet des cellules de la lignée monocyte-macrophage sur la croissance des hybridomes obtenus suite à la fusion de lymphocytes B et de cellules d'une lignée de myélome. Les résultats obtenus montrent que le surnageant de culture des macrophages (SC) permet d'obtenir un rendement aussi élevé en hybridomes viables que l'addition de cellules intactes. Cette activité n'est pas perdue lors de la dialyse du SC, mais est détruite par la trypsine, ce qui indique que le facteur actif (HGF) est une protéine de haut P.M. En vue de simplifier la caractérisation de ce facteur, nous avons mis au …
