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Colloque
La transitine est une protéine des filaments intermédiaires (FIs) exprimée de façon transitoire dans les tissus myogéniques et neurogéniques durant les premiers stades du développement embryonnaire. Alors que la localisation intracellulaire de la transitine dans le réseau de FIs a été démontrée dans les myoblastes et neuroblastes, l'obtention récente de l'anticorps monoclonal A2B11 a permis de mettre en evidence la présence d'une isoforme exprimée préférentiellement au niveau membranaire. Différentes approches biochimiques et immunologiques ont d'abord permis de clairement montrer que la protéine définie par A2B11 est une isoforme bona fide de la transitine. Par microscopie confocale, nous avons aussi observé …
Colloque
Le monde forestier reçoit une attention particulière de la part de la communauté internationale depuis plus d'une décennie au plan de sa performance environnementale. L'importance des forêts canadiennes associée à une volonté d'action a mené le Conseil Canadien des Ministres des Forêts (CCMF) à élaborer une liste de critères et d'indicateurs de développement forestier durable. Ces critères et leurs indicateurs apparaissent pertinents mais forment un système statique pour apprécier les aspects socio-économiques. Le modèle d'analyse des avantages concurrentiels de Porter représente un outil pour synthétiser l'ensemble des indicateurs socio-économiques reliés aux critères 5 et 6 du CCMF. Il nous permet …
Colloque
L'anticorps monoclonal CC-3, produit dans notre laboratoire, a permis de définir une isoforme hyperphosphorylée de la grande sous-unité de l'ARN polymérase II impliquée dans la transcription et dans l'épissage. CC-3 reconnaît principalement cette protéine dans des homogénats totaux de cellules interphasiques via un épitope phosphorylé. Toutefois, dans un homogénat de cellules en mitose, plus d'une vingtaine de phosphoprotéines différentes sont révélées par cet anticorps. L'entrée des cellules en mitose est provoquée par le MPF (cdk1/cycline B) qui phosphoryle plusieurs protéines régulatrices et structurales permettant le démantèlement des structures interphasiques pour l'établissement des activités propres à la mitose. Quelques-uns de ces …
Colloque
L'anticorps monoclonal CC-3 développé dans notre laboratoire reconnaît essentiellement un phosphoépitope sur deux protéines dans des cellules eucaryotes interphasiques : une isoforme hyperphosphorylée de la plus grande sous-unité de l'ARN polymérase II (RPB1) ainsi qu'une phosphoprotéine de poids moléculaire de 180 kDa (p180). In vitro, l'anticorps CC-3 inhibe l'épissage des ARN messagers précurseurs. De plus, suite à un choc thermique, une perte graduelle de l'épitope CC-3 est observée sur RPB1 alors que l'épitope est généré sur p180. L'effet observé après le choc thermique est réversible étant donné qu'après récupération à température normale, CC-3 reconnaît de nouveau RPB1 alors que la …
Colloque
Un anticorps monoclonal produit dans notre laboratoire nous a permis d'identifier une nouvelle phosphoprotéine nucléaire de 255kDa (p255). L'étude du patron obtenu en immunofluorescence met en évidence un marquage des granulations nucléaires des cellules interphasiques, marquage qui correspond exactement à la localisation des spliceosomes (marquage de snRNP anti Sm) et des granulations interchromatiniennes (marquage par un anti-PCNA). Le traitement des cellules à la RNase ou au choc thermique permet d'affirmer que la p255 a un comportement différent de celui des snRNPs. Des extractions de matrices nucléaires suivies par immunofluorescence et par Western permettent de confirmer la réactivité de la p255 …
Colloque
Nous avons découvert une protéine associée aux filaments intermédiaires (IFAPa-400) exprimée exclusivement dans les tissus myogéniques et endoneuraux de l'embryon de poulet. En plus de la spécificité de type cellulaire propre aux protéines de cette famille, IFAPa-400 a la propriété particulière de ne pas être exprimée que dans les stades précédant la différenciation des cellules musculaires et nerveuses. En vue de comprendre la relation structure-fonction de cette protéine géante (>400kD), nous avons entamé diverses approches de clonage moléculaire et de micro-séquençage de la protéine purifiée. Différents cDNAs correspondant à l'extrémité carboxy-terminale de cette protéine ont été isolés par criblage immunologique …
Colloque
L'anticorps monoclonal CC-3, produit dans notre laboratoire, réagit très fortement avec les cellules mitotiques de tous les organismes que nous avons étudiés. Dans les cellules interphasées, une nette réactivité est également observée mais demeure confinée à des granulations nucléaires. L'antigène est une protéine de 255kD dont l'immunoréactivité est conférée par un épitope phospho-dépendant. Dans le but de caractériser cette phosphoprotéine nucléaire, nous avons entrepris des études d'immunolocalisation et de compartiment biochimique, en utilisant l'anticorps CC-3 comme sonde. En microscopie confocale, nous avons observé une nette concentration de la p255 dans des amas extranucleolaires apparemment amotés. Par extractions successives de composants …
Colloque
Nous avons produit dans notre laboratoire un anticorps monoclonal (CC-3) dont la réactivité varie en fonction des périodes du cycle cellulaire. Dans les cellules en interphase, l'anticorps CC-3 reconnaît une protéine de 255 kD localisée dans le noyau. Cependant, lors de la mitose, l'immunoréactivité s'étend dans le cytoplasme et s'associe à des structures spécifiques telles que les centrosomes, le fuseau mitotique et le corps intermédiaire. L'analyse biochimique de l'activité mitotique a démontré que cette dernière est causée par la présence de plusieurs protéines dont les poids moléculaires varient de 50 à 300 kD. Nous avons observé que la variation de …
Colloque
La dystrophine est une protéine géante (M~ 427,000) qui est le produit du gène du locus de la dystrophie musculaire de type Duchenne (DMD) et Becker (BMD). On croit que cette protéine est associée au cytosquelette membranaire. Les objectifs de notre étude étaient: 1) de développer un essai immunologique rapide et quantitatif pour la dystrophine; 2) de déterminer si le contenu cellulaire en dystrophine varie selon le type de fibre musculaire. Des homogénats totaux de soleus (SOL: contraction lente, fibres de type I) et de vasteus superficiel latéral (SVL: contraction rapide, fibres de type II) ont été résolus par électrophorèse …
