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L'actine est une protéine que l'on retrouve dans la plupart des cellules eucaryotes. Elle est impliquée dans l'élaboration du cytosquelette et la motilité cellulaire. Pour jouer leur rôle, les microfilaments d'actine doivent être rattachés aux membranes. L'hypothèse actuelle est que les microfilaments d'actine sont ancrés aux membranes via des protéines intrinsèques. Cependant, nous avons aussi montré que l'actine peut se lier de façon directe avec les phospholipides membranaires. Cette interaction serait de type électrostatique médiée par les cations divalents. A l'aide d'un système in vitro composé de membranes artificielles et d'actine purifiée, nous avons étudié, par calorimétrie différentielle à balayage …
Le pétoncle géant, Placopecten magellanicus, est un bivalve à sexes séparés et à fécondation externe qui est commun dans les eaux du Golfe Saint-Laurent. Malgré l’importance commerciale de cette espèce, très peu d’information est disponible concernant la biologie de son développement. Pour combler cette lacune, l’ultrastructure des gamètes et la biologie du début du développement des embryons ont été analysées en microscopie électronique. Un matériel biologique de choix, le pétoncle géant, est induit à la ponte en laboratoire par des chocs thermiques, les pontes d’un même mâle contenant 72 µm de spermatozoïdes, et celles d’une femelle environ 70 µm d’ovocytes …
L'actine est une protéine du cytosquelette qui est impliquée dans de nombreux phénomènes de motilité cellulaire. Pour remplir ses fonctions, elle doit être ancrée membranaire. Il est généralement admis, dans la littérature, que l'actine est attachée aux membranes par l'intermédiaire d'autres protéines. Dans la première partie de ce travail, nous avons tout d'abord montré que l'actine peut aussi s'attacher aux phospholipides membranaires. Cette interaction dépend de la nature des lipides. Elle ne se produit que sur les lipides saturés tels le DPPC et le DLPC mais pas sur les lipides insaturés tels le DOPC. De plus, les cations divalents sont …
Au cours de ce travail, nous avons déterminé : 1) Quelles sont les protéines du cytosquelette de l'œuf d'oursin qui se fixent aux lipides membranaires, 2) Quels sont les lipides qui favorisent cette interaction, et 3) l'effet de la force ionique sur cette interaction. L'identification des protéines qui se fixent aux lipides membranaires a été faite en incubant les protéines du cytosquelette avec des liposomes, puis séparation des protéines non fixées par centrifugation sur gradient. Nos résultats montrent que dans un milieu à basse force ionique, 3 protéines marquées de 110, 70 et 68 kDa fixent aux lipides membranaires tandis …
Au cours de ce travail, nous avons déterminé : 1) Quelles sont les protéines du cytosquelette de l'œuf d'oursin qui se fixent aux lipides membranaires, 2) Quels sont les lipides qui favorisent cette interaction, et 3) l'effet de la force ionique sur cette interaction. L'identification des protéines qui se fixent aux lipides membranaires a été faite en incubant les protéines du cytosquelette avec des liposomes, puis séparation des protéines non fixées par centrifugation sur gradient. Nos résultats montrent que dans un milieu à basse force ionique, 3 protéines marquées de 110, 70 et 68 kDa fixent aux lipides membranaires tandis …
Au cours de ce travail, nous avons déterminé : 1) Quelles sont les protéines du cytosquelette de l'œuf d'oursin qui se fixent aux lipides membranaires, 2) Quels sont les lipides qui favorisent cette interaction, et 3) l'effet de la force ionique sur cette interaction. L'identification des protéines qui se fixent aux lipides membranaires a été faite en incubant les protéines du cytosquelette avec des liposomes, puis séparation des protéines non fixées par centrifugation sur gradient. Nos résultats montrent que dans un milieu à basse force ionique, 3 protéines marquées de 110, 70 et 68 kDa fixent aux lipides membranaires tandis …
Au cours de ce travail, nous avons déterminé : 1) Quelles sont les protéines du cytosquelette de l'œuf d'oursin qui se fixent aux lipides membranaires, 2) Quels sont les lipides qui favorisent cette interaction, et 3) l'effet de la force ionique sur cette interaction. L'identification des protéines qui se fixent aux lipides membranaires a été faite en incubant les protéines du cytosquelette avec des liposomes, puis séparation des protéines non fixées par centrifugation sur gradient. Nos résultats montrent que dans un milieu à basse force ionique, 3 protéines marquées de 110, 70 et 68 kDa fixent aux lipides membranaires tandis …
La phalloïdine est une toxine extraite d'Amanita virosa. Cette molécule a la propriété de polymériser et de stabiliser l'actine, protéine fondamentale impliquée dans le mouvement amiboïde. Nous avons étudié l'effet de cette toxine sur une amibe, Acanthamoeba castellanii, sur laquelle nous avons réalisé une perméabilisation vitale. Nous avons suivi les modifications morphologiques et ultrastructurales provoquées par cette toxine. En microscopie optique, nous avons noté un ralentissement des courants cytoplasmiques suivi d'un arrêt définitif. En même temps, il se produit un arrondissement des cellules et un regroupement des organites en une zone centrale nettement différenciée d'une zone périphérique hyaline. En microscopie …
L'interaction du cytosquelette et en particulier des filaments d'actine avec les membranes est à la base de nombreux phénomènes reliés à la motilité cellulaire. Il est généralement admis que l'interaction entre l'actine et les membranes se fait par l'intermédiaire de protéines trans-membranaires qui lient l'actine et dont l'activité contrôle l'attachement de l'actine aux membranes. Dans ce travail, nous avons montré qu'il peut exister aussi une interaction directe entre l'actine et les lipides membranaires. Cette interaction a été mise en évidence par les techniques de co-sédimentation de l'actine avec les liposomes ainsi que par viscosimétrie. Nos résultats indiquent que seuls les …
Le champignon toxique Amanita virosa que l'on retrouve en abondance au Québec contient 2 groupes de peptides: le premier groupe est formé par la phalloidine, peptide bicyclique qui réagit spécifiquement avec l'actine, dont il provoque la polymérisation irréversible. Le deuxième groupe de peptides est celui des virotoxines dont l'étude n'en est qu'à ses débuts. Nous avons réussi au cours de ce travail à séparer par chromatographie en phase liquide préparative le mélange de ces 5 composés, soit: la viroïdine, la desoxoviroïdine, l'[ala] viroïdine, la virosine et la désoxovirosine. Une étude systématique de l'interaction de ces peptides avec l'actine a été …