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Éléments de caractérisation moléculaire d'IFAPa-400
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Nous avons découvert une protéine associée aux filaments intermédiaires (IFAPa-400) exprimée exclusivement dans les tissus myogéniques et endoneuraux de l'embryon de poulet. En plus de la spécificité de type cellulaire propre aux protéines de cette famille, IFAPa-400 a la propriété particulière de ne pas être exprimée que dans les stades précédant la différenciation des cellules musculaires et nerveuses. En vue de comprendre la relation structure-fonction de cette protéine géante (>400kD), nous avons entamé diverses approches de clonage moléculaire et de micro-séquençage de la protéine purifiée. Différents cDNAs correspondant à l'extrémité carboxy-terminale de cette protéine ont été isolés par criblage immunologique …

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Éléments de caractérisation d'une nouvelle phosphoprotéine nucléaire mise en évidence par l'anticorps monoclonal CC-3
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L'anticorps monoclonal CC-3, produit dans notre laboratoire, réagit très fortement avec les cellules mitotiques de tous les organismes que nous avons étudiés. Dans les cellules interphasées, une nette réactivité est également observée mais demeure confinée à des granulations nucléaires. L'antigène est une protéine de 255kD dont l'immunoréactivité est conférée par un épitope phospho-dépendant. Dans le but de caractériser cette phosphoprotéine nucléaire, nous avons entrepris des études d'immunolocalisation et de compartiment biochimique, en utilisant l'anticorps CC-3 comme sonde. En microscopie confocale, nous avons observé une nette concentration de la p255 dans des amas extranucleolaires apparemment amotés. Par extractions successives de composants …

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Éléments de caractérisation d'une nouvelle phosphoprotéine nucléaire mise en évidence par l'anticorps monoclonal CC-3
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L'anticorps monoclonal CC-3, produit dans notre laboratoire, réagit très fortement avec les cellules mitotiques de tous les organismes que nous avons étudiés. Dans les cellules interphasées, une nette réactivité est également observée mais demeure confinée à des granulations nucléaires. L'antigène est une protéine de 255kD dont l'immunoréactivité est conférée par un épitope phospho-dépendant. Dans le but de caractériser cette phosphoprotéine nucléaire, nous avons entrepris des études d'immunolocalisation et de compartiment biochimique, en utilisant l'anticorps CC-3 comme sonde. En microscopie confocale, nous avons observé une nette concentration de la p255 dans des amas extranucleolaires apparemment amotés. Par extractions successives de composants …

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Isolement et clonage d'ADN complémentaires d'IFAPa-400
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Parmi les protéines associées aux filaments intermédiaires du cytosquelette des cellules embryonnaires (F9), il en existe une dont l'expression a été mise en évidence à l'aide d'un anticorps monoclonal produit dans notre laboratoire (Vincent M. et Lahaie C. (1988) Biochem. Cell Biol. 66: 184-192). Elle se retrouve principalement au niveau du myocarde et des autres tissus musculaires et nerveux. Cette protéine de très haut poids moléculaire (>400kD) laisse présager une séquence codante d'au moins 10000 pb. Une approche initiale fut de cribler une banque combinée d'ADNc et d'ADNg de embryon de poulet de 10 jrs (période à laquelle l'expression d'IFAPa-400 …

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Le cytosquelette sarcomérique: analyse électrophorétique des protéines myofibrillaires des muscles cardiaques et squelettiques
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Les myofibrilles des cellules musculaires contiennent un système cytosquelettique élaboré, subdivisé en domaine endo- et exosarcomériques. Nous avons entrepris la caractérisation des protéines cytosquelettiques des myofibrilles isolées des muscles cardiaques, soleus (SOL) et vastus lateralis (VSL) du rat. Les myofibrilles sont soumises à des extractions successives dans les tampons à haute teneur en sel contenant du détergent. Les résidus cytosquelettiques sont solubilisés dans l'urée et soumis à l'analyse électrophorétique en gels SDS-polyacrylamide (de 7 à 15%). Les résultats se résument ainsi. Une protéine de haute Mr (B1: ~500 x 10^3 D) est très abondante dans les cytosquelettes (CSK) des trois …

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