Veuillez choisir le dossier dans lequel vous souhaitez ajouter ce contenu :
Filtrer les résultats
Colloque
L’absorption intestinale du glucose de même que sa réabsorption rénale s’accomplissent grâce à un système de cotransport sodium/glucose localisé à la face apicale de ces épithélia. La protéine (SGLT1) responsable de cette fonction est constituée chez l’humain de 662 acides aminés et comporte 14 segments transmembranaires. L’utilisation des oocytes de Xenope s’est imposé au fil du temps comme un modèle de choix pour l’expression et l’étude de SGLT1 autant par sa simplicité et sa polyvalence technique que par son rendement élevé de synthèse. Le cotransporteur exprimé dans l’oocyte démontre des propriétés similaires à ce qui est retrouvé dans les tissus …
Colloque
La caractérisation moléculaire des systèmes de transport des acides aminés s'est avérée jusqu'à maintenant impossible en raison des problèmes reliés à la purification de cette classe de protéines membranaires hautement hydrophobes et qui ne sont exprimées qu'en très faible quantité dans la cellule. Une nouvelle approche utilisant l'oocyte de Xenopus laevis comme vecteur d'expression permet de contourner ces difficultés. L'expression du cotransporteur rénal Na+/proline a été évaluée sur des oocytes injectés à l'ARNm-poly(A)+ total extrait de cortex rénal de lapin. Après 4 jours d'incubation, l'accumulation Na+-dépendante de 3H-L-proline dans les oocytes (ARNm) est 2 fois supérieure à celle mesurée dans …
Colloque
La présente étude démontre qu'on peut utiliser avec succès la technique de "patch clamp" sur la membrane basolatérale du TCP perfusé après traitement de la membrane basale avec une faible concentration de collagénase. On peut alors observer, tout en mesurant le potentiel membranaire (Vm), l'activité de canaux potassiques dans des conditions où le transport transépithélial de sodium est isolé ou inhibé. En présence de 140 mM K+ dans la pipette, l'addition de glucose et d'alanine dans la lumière tubulaire réduit Vm de -36 à -4 mV et le courant entrant de 25 à 1.2 pA (n=4). Le canal observé est …
Colloque
La Na-K ATPase est une pompe membranaire qui transporte activement 3 ions Na+ contre 2 ions K+ et qui est responsable de l'établissement des gradients ioniques transmembranaires chez l'ensemble des cellules eucaryotes. L'activité de l'enzyme en fonction du potentiel membranaire (Vm) s'obtient directement de la mesure du courant sensible à la DHO, un bloqueur spécifique de la pompe, par la méthode de voltage imposé à deux microélectrodes appliquée aux ovocytes de Xenopus. Le courant de pompe (Ip) varie linéairement avec Vm de -150 à -25 mV, atteint un maximum (Ipmax) de 45±8 nA à +25 mV et initie une légère …
Colloque
Les protéines membranaires sont exposées à des champs électriques intenses et probablement variables à l'échelle microscopique. Ce champ étant susceptible d'influencer des changements conformationnels, nous avons voulu mesurer la stimulation du co-transport Na-glucose induite par des champs électriques appliqués sur des cellules rénales isolées. Nous avons effectué ces expériences en présence d'un champ continu de 0 à 22 V/cm et en absence de glucose, à une concentration de 0.1mM. En absence de champ, le transport d'αMG mesuré est de 0.92nM/mg de protéine en 5 min. L'application de champs d'amplitude de 5, 10 et 20 V/cm à une fréquence de 1, …
Colloque
La Na-K-ATPase est un enzyme de la membrane plasmagique qui transporte activement 3 ions Na+ contre 2 ions K+. Comme ce transport est électrogénique, il devrait, dans des conditions physiologiques, être stimulé par une dépolarisation cellulaire. En 86, Lafaire et Schwarz (J. Membrane Biol. 91:43-51) démontrèrent que de -200 à +20 mV cette relation est en effet observée mais qu'au delà de +20 mV le courant de pompe se met à chuter. Nous avons entrepris de vérifier cette relation en utilisant la technique de courant imposé à deux microélectrodes chez des ovocytes de Xenopus Laevis. La relation courant-voltage observée s'est …
Colloque
Afin d'établir les contributions respectives du Na+, K+ et Cl- à la conductance de la membrane apicale, le potentiel intracellulaire (Φbl) ainsi que le rapport entre les résistances membranaires apicales et basolatérales (RA/RBL) ont été mesurés sur des TCP de rein de lapin en microperfusion in vitro, en présence de différentes solutions dans la lumière tubulaire. P1 est un perfusat contenant (PC) sans glucose (G) et alanine (A). P2 est un P1 sans alanine mais comportant avec le Na (SO4, Pi, PO4, Z acetate). P2 Cycla est un P2 où tout le Cl- est remplacé par du cyclamate. Enfin P2 …
