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Colloque
Dans plusieurs types de cancer, la prolifération cellulaire non contrôlée semble découler d'une défaillance dans le mécanisme contrôlant la "mort programmée" ou apoptose. Des études récentes ont montré que des altérations des niveaux élevés de glutathion provoquaient chez l'emphécé l'induction d'apoptose dans plusieurs modèles cellulaires. Ces résultats suggèrent l'implication des radicaux libres dans le mécanisme apoptotique. Les radicaux libres ou le redox cellulaire de ces oxydants dans ces processus, nous utilisons des fibroblastes cellulaires de cellules Jurkat E6-1 surexprimant la glutathion peroxydase Se-dépendante (GSHpx) à des niveaux élevés. L'apoptose peut être induite dans la lignée Jurkat par différents stimuli physiologiques …
Colloque
La production de dérivés actifs de l’oxygène a été impliquée dans diverses pathologies incluant des dégénérescences tissulaires et le cancer. Une vitesse de mutations relativement élevée a été observée dans l’ADN mitochondrial (mt) et pourrait être le résultat d’un déséquilibre entre la production de dommages oxydatifs et leur réparation dans l’ADNmt. Le rôle potentiel de la défense antioxydante mitochondriale dans la préservation de l’intégrité de l’ADNmt a été investigué dans des cellules T47D-GPx-2 qui surexpriment une glutathion peroxydase Se-dépendante (GSHpx) et sont relativement résistantes aux dommages oxydatifs à la nucléaire induits par la méanédione. Les mitochondries de ces cellules contiennent …
Colloque
Une nouvelle technique, basée sur le marquage des extrémités terminales 3' de l'ADN par une réaction d'échange catalysée par la T4 ADN polymérase, a été mise au point pour analyser quantitativement les dommages à l'ADN de sites apuriniques/apyrimidiniques (AP) induits in vivo par divers agents clastogéniques. Les endonucléases IV de E. coli et la ADNase TDP libèrent des groupes hydroxyles linéaires sur les sites AP, induisant ainsi des "gaps" ont été spécifiquement détectés par les extrémités terminales 3' générées par la T4 ADNase. Cette technique a été utilisée pour mesurer la cinétique de formation de ces dommages et la capacité …
Colloque
Le niveau intracellulaire de glutathion peroxyde (GPx) a été proposé être un des facteurs intervenant dans la régulation de la 5-lipoxygénase (5-LO), une enzyme clé du métabolisme de l'acide arachidonique et de la biosynthèse des leukotriènes. Pour vérifier l'importance hypothétique des GPx dans le contrôle du shunt d'hydroperoxydes requis pour l'activation de la 5-LO, nous utilisons des transfectants duodulaires exprimant des niveaux de GPx normaux et un modèle animal où négation du niveau de GPx est effectuée par des vecteurs d'expression sens et antisens. Les deux principales lignées utilisées sont: des cellules promyéloblastiques humaines HL60 exprimant la 5-LO et des …
Colloque
Oxyuradioux et peroxydants ont été impliqués dans divers processus physiologiques normaux et pathologiques, incluant l'inflammation et la carcinogenèse. Bien que les glutathion peroxydases soient parmi les premières lignes de défense antioxydante, leur rôle dans ces processus n'est pas bien connu. À partir d'un clone cDNA, nous avons construit des vecteurs d'expression pour surproduire une glutathion peroxydase Se-dépendante. Ces gènes ont été introduits par transfection stable dans des cellules humaines. Nous avons transfecté des lignées cellulaires humaines d'origine épithéliale, plusieurs clones transgéniques ont été isolés qui surexpriment la Se-GSHPx à des degrés divers, d'une façon constitutive ou après induction par des …
Colloque
Nous voulons étudier le rôle et la fonction d'une glutathion S-transférase qui a une activité peroxydase (GST-GPx), dans le métabolisme des peroxydes et la résistance cellulaire à divers agents oxydants. Des vecteurs d'expression ont été construits afin de surexprimer à des degrés variables l'activité GST-GPx/Yc de rats dans des cellules humaines d'origine épithéliale. Nous avons fusionné un cDNA codant pour cet enzyme (reçu du Dr. C. Pickett) aux promoteurs transcriptionnels suivants: 1) E1 du cytomégalovirus humain (HCMV) conférant une expression constitutive (élevée 2) MMTV qui est inductible par des stéroïdes et 3) MMTV avec enhancer HCMV, afin d'augmenter le niveau …
