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Colloque
L'étude de la structure moléculaire du centromère chez les mammifères a été jusqu'à maintenant empêchée par la présence de grande quantité de courtes séquences répétées en tandem ADN satellite (ADNsat). Antérieurement, une séquence faiblement répétée (LC-A) conservée évolutivement et associée à l'ADN centromérique de génome de singe, a été isolée. p8, un sous-clone de LC-A, nous avait permis d'établir que, chez l'humain, les séquences homologues à LC-A existent en plusieurs copies et dans différentes localisations. Une de ces séquences, Locus D4S62, est liée au locus de la maladie de Huntington, (chromosome 4). Dans la librairie génomique de cellules somatiques du …
Colloque
Le but de notre recherche consiste à identifier la structure moléculaire de la région centromérique des chromosomes des mammifères. Le seul ADN centromérique connu est l'ADN satellite qui se compose de courtes séquences répétées en tandem. Antérieurement, des séquences répétées, LC-A, ont été isolées en association avec un ADN satellite centromérique chez le singe. Nous avons étudié l'organisation des séquences LC-A (les sous-clones P2 et P8) chez la souris. Les résultats de l'hybridation ADN/ADN in situ (Southern) démontrent que P2 et P8 hybridisent très fortement à un fragment commun (organisation majeure) et plus faiblement à d'autres fragments. Nous avons construit …
Colloque
Nous nous sommes intéressés à comprendre si l'ADN non répété lié à l'ADN satellite centromérique a une fonction quelconque en relation avec la région centromérique. Nous avons utilisé la PCR dans le but d'amplifier la jonction entre l'ADN déca-satellite (déca-δ) centromérique de singe et l'ADN non répété LC-A. Nous avons amplifié spécifiquement un fragment de 280pb. La séquence nucléotidique de ce fragment ne s'apparente pas au déca-δ. Malgré que la relation entre ce fragment de 280pb, le déca-δ et LC-A n'est pas définie, ce fragment a des propriétés très inhabituelles suggérant qu'il appartient à une nouvelle espèce de séquences répétées …
Colloque
Le centromère des mammifères est enrichi en séquences hautement répétées en tandem: ADN satellite. L'insert du phage λMkB cloné à partir du génome de singe (C. aethiops), a obtenu une portion de déca-Satellite, déca-S (ADN centromérique spécifique au singe) et des séquences à faible nombre de copies, LC-B, sous-clonées dans MB7 et MB12, qui sont conservées chez la souris et l'humain, mais pas chez le chien et le chat. L'hybridation de l'ADN de deux individus, singe 1 et 2, distincts de celui d'un cousin génotypé, a révélé plusieurs différences de restriction polymorphiques, particulièrement pour MB12. De plus, les patrons de …
Colloque
L'ADN satellite est le seul ADN connu qui est spécifiquement associé avec les régions centromériques des chromosomes d'eucaryotes supérieurs. L'ADN satellite est composé de courtes séquences répétées en tandem qui peut constituer jusqu'à 20% du génome. Nous sommes intéressées à comprendre les relations structurales et fonctionnelles entre l'ADN répétitif et l'ADN non répétitif. Un segment d'ADN génomique du singe africain, cloné dans le phage recombinant λMka, contient de l'ADN centromérique (deca-satellite) entouré de deux segments à faible nombre de copie (LC), définis comme "LC-A left" et "LC-A right". Ces segments LC contiennent des séquences qui sont très conservées dans l'évolution. …
Colloque
Un segment d'ADN génomique de singe (C. aethiops) contenant de l'ADN répétitif centromérique (deca-satellite) et de l'ADN à copie unique (LC-A) a été isolé précédemment dans le but d'étudier le rôle de l'ADN satellite. Ici nous avons utilisé un clone (p8) contenant un segment d'ADN génomique, qui est associé dans le génome avec LC-A, comme sonde pour différents types d'ARN. Cette sonde détecte un transcript de 5.0 kb dans tous les tissus et lignées cellulaires analysés (CV-1, cerveau, prostate, foie, etc...) ainsi que toutes les espèces étudiées (homme, singe, rat). Même si ce transcript comigre avec l'ARNm de 5.0 kb, …
Colloque
La région centromérique des chromosomes de mammifères est riche en ADN répété en tandem et défini comme l'ADN satellite (ADNs). Nous désirons vérifier l'hypothèse suggérant que ces segments uniques localisés à proximité de l'ADNs soient responsables d'événements d'amplifications et de délétions pouvant générer le singe. Deux clones génomiques de singe (Cercopithecus aethiops) isolés indépendamment (phages λMKA et λMKA') contiennent le fragment LC-A (estimé à un exemplaire par génome) adjacent à l'ADNs dans le cas du clone λMKA et à un segment unique défini comme p8 dans le cas du clone λMKA'. L'insertion de λMKA' présente l'organisation génomique retenue de la …
Colloque
Dans le but d'étudier le rôle de l'ADN satellite dans le génome des cellules eucaryotes, nous avons récemment isolé un segment d'ADN génomique de singe (C. aethiops) contenant de l'ADN répétitif centromérique (découvert initialement) et de l'ADN à copie unique (LC-A). Ce fragment d'ADN génomique est contenu dans le même clone. Le jumelage de la région LC-A est aussi associé avec de l'ADN satellite spécifique dans le génome humain et murin. Les expériences de transfert d'ADN ("SOUTHERN") indiquent que l'organisation de l'ADN génomique macaque est similaire à celle observée pour l'organisation homologue de l'ADN homologue LC-A dans le génome. Ces …
