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Colloque
L'arginine estérase (AgE) est la protéine androgéno-dépendante majeure sécrétée par la prostate canine. Le gène complet correspondant à l'AgE a été cloné et séquencé à partir d'une banque génomique commerciale (Clontech) puis séquencé dans sa totalité (5,5 kb). La portion 5' du gène est occupée par une boîte TATA variant (TATAAA), une boîte CCAAT, un site potentiel de liaison pour le facteur de transcription Sp1 (GGGCGGG) et une inversion répétitive de 7 paires de bases suivie d'une séquence répétitive de GT. De plus, l'analyse des transcrits, par extension à l'aide d'une amorce et par PCR, a permis de définir le …
Colloque
L'arginine estérase de la prostate canine est sécrétée sous l'influence des androgènes; l'ARN messager (ARN m) qui code pour la protéine connaît également des variations reliées au status androgénique de l'animal. Afin de mieux cerner l'effet des androgènes sur le taux transcriptionnel du gène de l'arginine estérase, nous avons développé une technique de préparation de noyaux de cellules prostatiques canines. Ces noyaux sont capables d'effectuer la transcription d'un gène in vitro. Notre procédure implique l'homogénéisation du tissu dans du sucrose 0,25 M (contenant 50 mM de Tris-HCl pH 7,5 et 5 mM de Mg SO4), un lavage au triton X-100 …
Colloque
Le potentiel androgéno-dépendant du muscle squelettique (MS) est suggéré par la présence de sites de liaison de haute affinité. L'utilisation de sondes moléculaires fut préconisée afin de générer des données quantitatives sur la réponse cellulaire du MS lors de modifications importantes de la testostéronémie. Une première étape expérimentale a permis d'établir la modulation différentielle des messagers de la créatine kinase (CK) et de l'actine dans le muscle androgéno-dépendant levator ani (LA). Un oligonucéotide de synthèse correspondant à la partie 3' non-codante de CK de même qu'un ADNc comprenant 1.1 Kb de la séquence codante de β-actine furent hybridés sur l'ARN …
Colloque
L'α-glucosidase du plasma séminal de bélier a été purifiée afin d'approfondir nos connaissances au sujet de cet enzyme et de son rôle dans la physiologie épididymaire. L'enzyme se comporte différemment des α-glucosidases des autres dons puisqu'il ne présente pas d'affinité au dextran (gels Sephadex) ainsi qu'une approche de 18% avec le méthanol. Une première purification à l'éthanol, puis une chromatographie sur hydroxyapatite, se termine par une échangeuse d'ions DEAE Sepharose CL-GB, une focalisation isoelectrique de pH4.5 dans un est une ultrafiltration. Le matériel purifié contient de l'α-glucosidase de 9822 avec un rendement global de 5%. Le matériel purifié est composé …
Colloque
Du liquide séminal humain a été isolé et purifié une protéine de 94 acides aminés capable d'inhiber la sécrétion de la lutropine (LH) et de la follitropine (FSH) par des cellules cultivées d'hypophyse de rat. Cette activité est du type "inhibine" puisqu'elle affecte la FSH plus que la LH. La séquence complète de la protéine a été déterminée. Cette protéine est localisée surtout dans les cellules épithéliales de la prostate. A partir d'ARN polydénylé isolé de cet organe, une librairie d'ADN complémentaire a été construite. Elle a été criblée avec des sondes oligonucléotidiques synthétiques basées sur la séquence peptidique. Plusieurs …
