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Colloque
La poly(ADP-ribose) polymérase (PARP) est une enzyme nucléaire qui, par modification post-traductionnelle de certaines protéines, semble jouer un rôle dans différents mécanismes cellulaires importants, tels la réparation de l’ADN, la transcription, la carcinogénèse et l’apoptose. Bien que la PARP soit exprimée de façon ubiquitaire, son niveau d’expression varie d’un tissu à l’autre. Récemment, nous avons montré que le facteur de transcription Sp1 se lie in vitro à cinq régions distinctes riches en résidus GC du promoteur de la PARP du rat. La mutagénèse dirigée des trois sites Sp1 proximaux a généré une baisse significative de la transcription du promoteur PARP …
Colloque
Les intégrines constituent une famille de molécules d'adhésion impliquées dans les interactions cellules-cellules et cellules-matrice. Chacune est composée d'une sous-unité a et d'une sous-unité b associées entre-elles de façon non-covalente. De plus, les intégrines participent à plusieurs fonctions cellulaires dont le développement embryonnaire, la croissance des cellules tumorales, la résorption osseuse ainsi que la cicatrisation cornéenne. Puisque l'intégrine a4b1 lie la fibronectine, un agent de cicatrisation important et une des principales composantes de la matrice extracellulaire, des études visant à caractériser les éléments cis-actifs homologues présents dans le promoteur de ce gène et avec lesquels des protéines nucléaires interagissent ont …
Colloque
Le gène de l'hormone de croissance chez le rat (rGH) n'est transcrit que dans les cellules somatotropes dérivées du lobe antérieur de l'hypophyse. Sa répression dans les tissus non-permissifs est en partie assurée par la présence de 2 éléments de régulation négatifs désignés silencer-1 et -2. Ces éléments possèdent le potentiel de réprimer l'activité du promoteur hétérologue PZ1, utilisé dans ces travaux à titre de modèle expérimental. Nous avons démontré que cette répression dépendait de la liaison de certains membres de la famille CTF/NF1 (notamment le facteur NF1-L) avec ces éléments silencieux. Par mutagenèse dirigée, nous avons démontré que l'influence …
Colloque
Les intégrines sont une famille de molécules d'adhésion impliquées dans les interactions cellule-cellule et cellule-matrice. Chacune est constituée d'une sous-unité α et β associées entre elles de façon non-covalente. Le caractère propre à l'intégrine α4β1 étant dû au fait qu'elle est exprimée de façon tissu-spécifique, celle-ci n'étant présente qu'à la surface des cellules lymphoïdes et monocytes. Le promoteur de la région 5' régulatrice de ce gène encodant la sous-unité α4 ont récemment été clonés et séquencés. Afin d'élucider le rôle que pourrait exercer cette intégrine dans la caractérisation de l'épithélium cornéen, nous avons initié la caractérisation des éléments cis-actifs présents …
Colloque
La Poly(ADP-Ribose) Polymérase (PARP) est une enzyme nucléaire pouvant modifier, après leur traduction, des protéines nucléaires par l’ajout de chaînes d’ADP-ribose. Bien que la fonction précise de l’enzyme ne soit pas entièrement élucidée, il est cependant connu qu’elle est impliquée dans des phénomènes biologiques importants tels que la réparation et la réplication de l’ADN de même que dans la différenciation cellulaire. L’étude de la régulation de l’expression du gène de la PARP a conduit au clonage et à la séquence de la région 5’ régulatrice et du promoteur basal du même gène à l’identification de cinq sites (F1 à F5) …
Colloque
Le gène déterminant la synthèse de l'hormone de croissance chez le rat (rGH) est exprimé spécifiquement par certaines cellules du lobe antérieur de l'hypophyse. Des travaux antérieurs ont permis d'identifier deux éléments de régulation négative (silencers) importants pour la répression du gène de la GH dans les cellules non-permissives. L'élément le plus proximal (silencer I) contient les sites de liaisons de deux protéines différentes: le facteur de transcription NF1-L et une nouvelle protéine désignée SBP2 pour "silencer binding protein 2". La séquence d'ADN reconnue par SBP2 démontre aucune homologie avec celle reconnue par d'autres facteurs de transcription. Des résultats récents …
Colloque
De nombreuses évidences démontrent que la fibronectine en combinaison avec ses récepteurs cellulaires, les intégrines α4/β1 et α5/β1, exercerait un rôle important lors du phénomène de réépithélialisation pendant la cicatrisation de la cornée. Notre but est donc de déterminer les mécanismes de régulation transcriptionnelle du gène de la sous-unité α4 dans les cellules épithéliales de la cornée. Les rétentions en gel effectuées avec des extraits nucléaires préparés à partir de ces cellules montrent trois complexes spécifiques. Un de ces complexes donne deux zones de protection en interférence de méthylation au DMS: une près de la région -20 et l'autre à …
Colloque
Après introduction des gènes rapporteurs CAT (chloramphénicol acétyl transférase) dans le thymus de souris transgéniques, nous avons observé plusieurs lignées présentant des problèmes de fertilité. Certains mâles sont stériles alors que d'autres ne produisent que des portées réduites. L'analyse histologique a révélé des anomalies tant au niveau de la forme que du nombre de spermatozoïdes. L'analyse par Northern et par hybridation in situ a de plus montré une expression de la thymidine kinase restreinte au testicule, précisément à l'intérieur des spermatides rondes. Cela laisse présager l'existence d'un promoteur cryptique à l'intérieur de la séquence codante de la thymidine kinase virale …
Colloque
Le gène déterminant la synthèse de la GH chez le rat n'est exprimé que par certaines cellules provenant du lobe antérieur de l'hypophyse. Il a été démontré que cette répression tissu-spécifique pouvait résulter de l'absence du facteur de transcription Pit-1 et de la présence d'une protéine nucléaire (SBP1) se liant à 2 séquences régulatrices essentielles à la répression de la GH et désignées Silencer-1 et 2. Nous avons démontré que SBP1 interagit avec une séquence identique à celle reconnue par l'activateur transcriptionnel NFI-1, soit la forme de la protéine NFI retrouvée dans le foie de rat. Cependant, ce facteur n'est …
Colloque
Le produit du gène P12 est un inhibiteur de protéase synthétisé de façon androgéno-dépendante dans la prostate, les vésicules séminales et les glandes coagulantes. De manière à établir les mécanismes de spécificité d'expression tissulaire du gène P12, nous avons produit plusieurs lignées de souris transgéniques sous le contrôle des promoteurs CAT (chloramphénicol transférase) et TK (thymidine kinase) placés sous le contrôle de différents fragments de la région 5' du gène P12 du gène. Les mâles issus des quatre gènes microinjectés présentent des proportions de fertilité. L'analyse histologique des coupes de testicules provenant des mâles stériles a révélé des anomalies au …
