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La formation de métastases est une étape importante au développement tardif et à l'étendue d'un cancer. Pour en connaître les principes, il est essentiel de clarifier les mécanismes impliqués dans la migration cellulaire et dans les transitions épithélium-mésenchyme (TEM). Les protéines qui composent la famille des PAK (p21-activated kinase) sont des sérine/thréonine kinases, effectrices des petites GTPases Rac et Cdc42, impliquées dans le réarrangement du cytosquelette et qui répondent à la signalisation par les récepteurs de la famille des Eph. L'expression tissulaire précoce de PAK1 (p21-activated kinase) chez Xenopus suggère un rôle potentiel pour celle-ci dans l'organogenèse et la migration …
L’enhanceosome ribosomal est une structure formée par le facteur de transcription architectural xUBF, qui sous forme de dimère se lie colinéairement à l’ADNr via ses trois boîtes HMG en N-terminal, de sorte que 120 à 140 p.b. d’ADN se trouvent enroulées dans une boucle de 360o. La structure de l’enhanceosome et son phasage sur le promoteur procurent une explication plausible à la sensibilité des éléments du promoteur CORE et UCE ainsi que du terminateur proximal à l’espacement les séparants. La formation de l’enhanceosome est précisément phasée par rapport aux séquences d’ADN sous-jacentes, malgré le fait que xUBF ne démontre que …
Nous avons isolé et étudié l'expression ainsi que la fonction de la kinase sérine/thréonine de Xenopus, xPAK (p21ras-like GTPase associated kinase). Cette kinase est un membre de la famille ste20 et serait impliquée dans l'activation des MAP-Kinases de stress (SAPK). Durant le développement de Xenopus, le gène XPAK est exprimé comme un message maternel qui décroît en concentration à partir de la fertilisation jusqu'au début de la gastrulation. On note la première expression zygotique de xPAK dans la plaque basale du tube neural dans la région caudale et plus tard, dans la placode otique ainsi que dans les cellules séparant …
Des études de microinjection ont montré l'importance, in vivo de certains nucléotides à l'intérieur du promoteur (CORE et UCE) des gènes ribosomiques de Xénopus laevis. Nous avons comparé ces résultats avec ceux obtenus par transcription in vitro dans des extraits protéiques nucléaires de cellules de Xénopus laevis en culture et avec les sites de liaison du facteur de transcription xUBF par empreintes à la 'DNase I (footprint). Dans 2 cas particuliers, par exemple, le taux de transcription in vitro des promoteurs mutés à -33 et à -7 a drastiquement diminué à respectivement 10% et 2% du taux obtenu avec le …
A l'aide d'une technique de clonage sélective, nous avons isolé un clone contenant des séquences génomiques correspondant à un orphon ribosomique. Parmi ces séquences, on retrouve celle du promoteur de la polymérase I et des amplificateurs (enhancers). Ces mêmes séquences furent retrouvées par analyse de Southern dans le génome de trois grenouilles différentes et sous une forme modifiée, dans des cellules en culture. Par analyse d'électrophorèse à champs pulsés, nous avons montré que notre fragment migrait différemment du locus ribosomique par conséquent qu'il n'y était pas physiquement associé. Nous concluons donc cet orphon est le résultat d'un événement de translocation/recombinaison.
Le gène du précurseur 40S de l'ARNr chez X. laevis est une répétition en tandem d'environ 400 unités séparées par une région intergénique impliquée dans le contrôle de la transcription du gène. Ce contrôle implique donc plusieurs séquences d'ADN et plusieurs protéines. L'interaction entre ces deux éléments a déjà fait l'objet d'études par protection à la DNaseI in vitro, et on a pu définir des régions protégées par des facteurs de transcription purifiés. Nous avons ici utilisé la technique d'amplification linéaire de séquences par la polymérase Taq (PCR linéaire) pour permettre ces études in vivo, en effectuant des expériences de …