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Les leukotriènes ont été l'objet d'études très intenses parce qu'ils sont responsables d'activités biologiques importantes à la réaction inflammatoire. L'enzyme 5-lipoxygénase (5-LO) catalyse la première réaction conduisant à la formation des leukotriènes. L'enzyme subit une régulation au niveau traductionnel et post-traductionnel complexe. Les neutrophiles du liquide synovial (LS) de patients atteints d'arthrite rhumatoïde (AR) synthétisent moins de leukotriènes que les cellules du sang périphérique (SP). Nous avons mesuré l'accumulation de l'ARNm de la 5-LO et de la protéine dans les neutrophiles de sujets normaux, du SP et du LS de patients arthritiques. Les neutrophiles du LS produisent 4 à 5 …
Le liquide synovial de 12 patients atteints d'arthrite rhumatoïde est prélevé sur EDTA (conc. fin. 5 mM). Après comptage cellulaire, le liquide synovial dilué (avec NaCl 0.9%) est centrifugé 30 min à 450 g (20°C) sur Ficoll-Paque (Pharmacia). Les cellules de l'interface (mononucléaires: lymphocytes et macrophages ou LM) et les cellules du culot (polymorphonucléaires ou PMN) sont collectées séparément, lavées et resuspendues en tampon phosphate (PBS). L'incubation cellulaire dure 5 h à 37°C en présence d'ionophore A23187 (2 µM) et/ou d'acide arachidonique (30 µM); la réaction est arrêtée par l'addition (V/V) de méthanol : acétone (1/1). Les produits de la …