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Colloque
Les métallothionéines (MT) sont des protéines de stress qui participent au métabolisme des métaux essentiels (Zinc, Cuivre) et qui protègent l’organisme contre l’intoxication en fixant les ions de métaux lourds. Les gènes des MT sont inductibles au niveau transcriptionnel par les métaux et cette stimulation est assurée au niveau de l’ADN par des séquences appelées MRE, sur lesquelles se fixent des protéines de régulation activées par les métaux. Ces protéines agiraient comme détecteurs intracellulaires de métaux et comme activateurs de la transcription. Dans le but de caractériser deux de ces protéines nucléaires, MEP-1 et MTF-1, nous avons procédé à des …
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Le facteur d’inhibition de croissance neurale, GIF, aussi appelé métalothioneine-III (MT-III), inhibe la survie des neurones en culture, et son expression est réprimée chez les patients souffrant de la maladie d’Alzheimer. L’expression de MT-III se distingue des autres MT de deux façons : 1) MT-III se retrouve uniquement dans le cerveau, les autres MT étant exprimées dans la plupart des tissus. 2) MT-III n’est pas stimulable par les métaux lourds bien que son promoteur possède, comme les autres MT, des éléments de réponse aux métaux lourds (MRE). Dans le but d’identifier les éléments du promoteur de MT-III responsables de son …
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Les métallothionéines (MT) sont des petites protéines riches en cystéine qui ont la capacité de lier certains ions métalliques (Zn2, Cu2, Cd2) et sont impliquées dans le métabolisme des métaux essentiels et dans la détoxification des métaux toxiques. Les gènes encodant les MT sont stimulables au niveau transcriptionnel par les métaux. Cette stimulation fait intervenir des éléments de régulation (MRE) présents en six copies (MREa à MREf) imparfaites dans le promoteur du gène MTI de souris. Le nombre de protéines nucléaires capables de lier les MRE n'a pas encore été clairement déterminé. Nous avons déjà purifié une protéine, MEP-1, capable …
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L'ensemble du système nerveux est dérivé du neuroectoderme (NE). Lors de la neurulation, le NE se réorganise afin de former le tube neural. La morphogenèse du tube neural et la différenciation subséquente des cellules du NE en une variété de cellules neurales impliquent l'expression temporelle et spatiale de gènes particuliers. Afin d'étudier les mécanismes gouvernant l'expression génique différentielle dans le NE lors de la neurulation, nous avons isolé des marqueurs moléculaires de gènes NE dont l'expression est régulée au cours du développement. Nous avons généré une banque d'une sonde d'ADNc enrichis pour des gènes exprimés spécifiquement dans le NE d'embryons …
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Les métallothionéines (MTs) sont de petites protéines riches en résidus cystéine capables de lier les ions métalliques. La biosynthèse des MTs est contrôlée au niveau transcriptionnel par différents stimuli tels les métaux lourds, les hormones et les interleukines. Le processus d'induction par les métaux lourds est dépendant de la présence de courtes séquences nucléotidiques (MREs) situées en amont des gènes. Des facteurs de régulation interagissant avec ces MREs. Des expériences d'irradiation aux rayons UV et de retardement sur gel démontrent que les facteurs nucléaires MEP-1 et MBF-1 sont différents, notamment par le poids moléculaire. De plus, au moyen de la …
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Les métallothionéines (MTs) sont des protéines riches en cystéines qui lient les ions métalliques tels que le Cd2+, le Zn2+ et le Cu2+. Leur biosynthèse est induite par ces métaux et elles seraient impliquées dans l'homéostasie des métaux lourds essentiels. Deux isoformes de la protéine sont présentes chez les mammifères mais une seule est détectée chez la plupart des autres vertébrés. Nous avons cloné et séquencé un ADNc codant pour la MT chez Xenopus laevis. Cet ADNc (xMT) a 730 pb et contient un cadre de lecture unique codant pour une protéine de 62 acides aminés dont 20 cystéines. La …
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Les métallothionéines (MTs) sont de petites protéines capables de lier les métaux lourds et dont la biosynthèse est induite par les métaux que la protéine lie. Cette induction s'effectue au niveau transcriptionnel et implique de courtes séquences d'ADN (MREs) situées en amont des gènes, de même que des facteurs de régulation interagissant avec ces MREs. Au moyen d'une procédure de transfert protéique et d'expériences d'irradiation aux rayons UV, nous avons mis en évidence une protéine nucléaire de poids de 108 kDa, MEP-1, capable de lier avec différents degrés d'affinité les MREs des gènes des MTs. Cette protéine n'est pas glycosylée …
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Les métallothionéines (MTs) sont des petites protéines qui lient les métaux lourds. Elles existent chez plusieurs organismes, de la levure aux primates, et leur biosynthèse est inductible par les métaux qu'elles lient. Nous avons entrepris le clonage des gènes à MTs chez les amphibiens. Nous avons obtenu par réaction en chaîne avec la polymérase (PCR) des fragments de 180 et 200 pbs d'ADN complémentaires (ADNc) de MT d'amphibiens X. laevis et A. mexicanum (axolotl). Les réactions PCR ont été faites avec des oligodésoxynucléotides dégénérés correspondant à une région des MTs très fortement conservée entre les espèces et de l'ADN préparé …
Colloque
Les métallothionéines (MTs) sont de petites protéines qui lient les métaux lourds tels que le cadmium, le zinc et le cuivre et dont les gènes sont inductibles par les mêmes métaux que la protéine lie. L'activation par les métaux lourds du gène de la MT de souris est assurée par cinq éléments de régulation, MREs, situés dans le promoteur du gène et sur lesquels se lieraient des facteurs cellulaires. Au moyen d'un test de protection contre l'exonucléase III, nous montrons que tous les MREs du gène de la MT-I de souris de même que les éléments MRE-4 du gène MT-II …
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La molécule d'adhésion des cellules neurales, N-CAM, est une glycoprotéine de surface exprimée très tôt dans la neuroectoderme (NE) lors de la morphogenèse neurale. Chez le poulet et la souris, N-CAM est exprimée dans les cellules neurales et musculaires, alors que chez l'amphibien Xenopus laevis (anoure), l'expression des ARN messagers de N-CAM est strictement limitée au NE. En vue d'étudier l'expression génique de N-CAM dans le NE nous avons cloné l'ADN complémentaire (ADNc) de N-CAM chez Ambystoma mexicanum (urodèle). Une génothèque contenant 2.5 x 10⁶ clones indépendants a été construite dans le vecteur λgt11 avec de l'ARN poly[A] provenant d'embryons …
