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L'ensemble du système nerveux est dérivé du neuroectoderme (NE). Lors de la neurulation, le NE se réorganise afin de former le tube neural. La morphogenèse du tube neural et la différenciation subséquente des cellules du NE en une variété de cellules neurales impliquent l'expression temporelle et spatiale de gènes particuliers. Afin d'étudier les mécanismes gouvernant l'expression génique différentielle dans le NE lors de la neurulation, nous avons isolé des marqueurs moléculaires de gènes NE dont l'expression est régulée au cours du développement. Nous avons généré une banque d'une sonde d'ADNc enrichis pour des gènes exprimés spécifiquement dans le NE d'embryons …
L'ensemble du système nerveux est dérivé du neuroectoderme (NE). Lors de la neurulation, le NE se réorganise afin de former le tube neural. La morphogenèse du tube neural et la différenciation subséquente des cellules du NE en une variété de cellules neurales impliquent l'expression temporelle et spatiale de gènes particuliers. Afin d'étudier les mécanismes gouvernant l'expression génique différentielle dans le NE lors de la neurulation, nous avons isolé des marqueurs moléculaires de gènes NE dont l'expression est régulée au cours du développement. Nous avons généré une banque d'une sonde d'ADNc enrichis pour des gènes exprimés spécifiquement dans le NE d'embryons …
L’acide rétinoïque (AR) est un morphogène impliqué dans la différenciation cellulaire dont l’action est modulée par des récepteurs nucléaires. Chez la souris, l’AR possède trois récepteurs (RAR), α, ß et γ; le récepteur γ est exprimé dans le tube neural. Afin d’étudier le rôle de l’AR lors de la neurulation, nous avons cloné le RAR γ de l’axolotl Ambystoma mexicanum, en utilisant une banque d’ADN complémentaire (cADNc) d’embryon (stade 18) avec une sonde d’ADNc obtenue du Dr. V. Giguère correspondant au domaine de liaison de l’ADN du RAR ß (NB8) et N. viridescens (NV). Douze clones furent analysés par hybridation …
Les métallothionéines (MTs) sont des petites protéines qui lient les métaux lourds. Elles existent chez plusieurs organismes, de la levure aux primates, et leur biosynthèse est inductible par les métaux qu'elles lient. Nous avons entrepris le clonage des gènes à MTs chez les amphibiens. Nous avons obtenu par réaction en chaîne avec la polymérase (PCR) des fragments de 180 et 200 pbs d'ADN complémentaires (ADNc) de MT d'amphibiens X. laevis et A. mexicanum (axolotl). Les réactions PCR ont été faites avec des oligodésoxynucléotides dégénérés correspondant à une région des MTs très fortement conservée entre les espèces et de l'ADN préparé …
La molécule d'adhésion des cellules neurales, N-CAM, est une glycoprotéine de surface exprimée très tôt dans la neuroectoderme (NE) lors de la morphogenèse neurale. Chez le poulet et la souris, N-CAM est exprimée dans les cellules neurales et musculaires, alors que chez l'amphibien Xenopus laevis (anoure), l'expression des ARN messagers de N-CAM est strictement limitée au NE. En vue d'étudier l'expression génique de N-CAM dans le NE nous avons cloné l'ADN complémentaire (ADNc) de N-CAM chez Ambystoma mexicanum (urodèle). Une génothèque contenant 2.5 x 10⁶ clones indépendants a été construite dans le vecteur λgt11 avec de l'ARN poly[A] provenant d'embryons …
L'involution, au cours de la gastrulation du chordomesoderme conduit à la différenciation de l'ectoderme indifférencié en ectoderme neural ou neuroépithélium. Le développement du neuroépithélium en un tube, le tube neural, implique l'expression temporelle et spatiale d'une série de gènes spécifiques. En vue d'identifier et caractériser ces gènes, nous avons construit une génothèque d'ADN complémentaire (ADNc) correspondant aux messagers exprimés chez des neurulas (stade 16) d'Ambystoma mexicanum (axolotl). Nous avons isolé l'ARN total par la méthode du LiCl qui donnait un ARN d'excellente qualité et très bon rendement. L'ARN poly(A)+ a été purifié avec une colonne d'Oligo(dT) puis utilisé pour synthétiser …
Les métallothionéines (MT) sont des protéines ubiquitaires de faibles poids moléculaires, riches en cystéine, qui lient des métaux lourds tels que le cuivre, le zinc et le cadmium. Le gène des MTs ou leurs ADN complémentaires ont été clonés chez les primates, les rongeurs, les insectes, l'oursin de mer, la levure et les champignons. La classe des amphibiens est intéressante pour comprendre le rôle biologique des MTs à cause de sa situation phylogénique parmi les vertébrés. Une génothèque génomique a été construite avec l'ADN génomique sanguin de l'urodèle Ambystoma mexicanum. L'ADN a été digéré avec l'enzyme Hind III, séparé par …
Les métallothionéines (MT) sont des protéines ubiquitaires de faibles poids moléculaires, riches en cystéine, qui lient des métaux lourds tels que le cuivre, le zinc et le cadmium. Le gène des MTs ou leurs ADN complémentaires ont été clonés chez les primates, les rongeurs, les insectes, l'oursin de mer, la levure et les champignons. La classe des amphibiens est intéressante pour comprendre le rôle biologique des MTs à cause de sa situation phylogénique parmi les vertébrés. Une génothèque génomique a été construite avec l'ADN génomique sanguin de l'urodèle Ambystoma mexicanum. L'ADN a été digéré avec l'enzyme Hind III, séparé par …
Les métallothionéines (MT) forment une classe de petites protéines qui lient les métaux lourds et dont la synthèse est activable au niveau transcriptionnel par les métaux auxquels se lie la protéine. La présence de courtes séquences de nucléotides en région 5' du gène, où éléments de régulation par les métaux lourds (ERM), confère au gène la propriété d'être inductible par les métaux lourds. Nous rapportons la détection, in vitro, dans des extraits de digest de levures des enzymes exonucleases III et ADNase I, de facteurs nucléaires de souris qui se lient aux sites d'initiation de la transcription (position +1). Les …
Les métallothionéines (MT) forment une classe de petites protéines qui lient les métaux lourds et dont la synthèse est activable au niveau transcriptionnel par les métaux auxquels se lie la protéine. La présence de courtes séquences de nucléotides en région 5' du gène, où éléments de régulation par les métaux lourds (ERM), confère au gène la propriété d'être inductible par les métaux lourds. Nous rapportons la détection, in vitro, dans des extraits de digest de levures des enzymes exonucleases III et ADNase I, de facteurs nucléaires de souris qui se lient aux sites d'initiation de la transcription (position +1). Les …