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Clonage de l’ADN complémentaire du récepteur de l’acide rétinoïque gamma chez Ambystoma mexicanum
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L’acide rétinoïque (AR) est un morphogène impliqué dans la différenciation cellulaire dont l’action est modulée par des récepteurs nucléaires. Chez la souris, l’AR possède trois récepteurs (RAR), α, ß et γ; le récepteur γ est exprimé dans le tube neural. Afin d’étudier le rôle de l’AR lors de la neurulation, nous avons cloné le RAR γ de l’axolotl Ambystoma mexicanum, en utilisant une banque d’ADN complémentaire (cADNc) d’embryon (stade 18) avec une sonde d’ADNc obtenue du Dr. V. Giguère correspondant au domaine de liaison de l’ADN du RAR ß (NB8) et N. viridescens (NV). Douze clones furent analysés par hybridation …

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Clonage et expression de la molécule d'adhésion des cellules neurales, N-CAM, chez l'amphibien Ambystoma mexicanum
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La molécule d'adhésion des cellules neurales, N-CAM, est une glycoprotéine de surface exprimée très tôt dans la neuroectoderme (NE) lors de la morphogenèse neurale. Chez le poulet et la souris, N-CAM est exprimée dans les cellules neurales et musculaires, alors que chez l'amphibien Xenopus laevis (anoure), l'expression des ARN messagers de N-CAM est strictement limitée au NE. En vue d'étudier l'expression génique de N-CAM dans le NE nous avons cloné l'ADN complémentaire (ADNc) de N-CAM chez Ambystoma mexicanum (urodèle). Une génothèque contenant 2.5 x 10⁶ clones indépendants a été construite dans le vecteur λgt11 avec de l'ARN poly[A] provenant d'embryons …

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Identification de gènes spécifiquement exprimés dans le neuroépithélium de l'amphibien Ambystoma mexicanum
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L'involution, au cours de la gastrulation du chordomesoderme conduit à la différenciation de l'ectoderme indifférencié en ectoderme neural ou neuroépithélium. Le développement du neuroépithélium en un tube, le tube neural, implique l'expression temporelle et spatiale d'une série de gènes spécifiques. En vue d'identifier et caractériser ces gènes, nous avons construit une génothèque d'ADN complémentaire (ADNc) correspondant aux messagers exprimés chez des neurulas (stade 16) d'Ambystoma mexicanum (axolotl). Nous avons isolé l'ARN total par la méthode du LiCl qui donnait un ARN d'excellente qualité et très bon rendement. L'ARN poly(A)+ a été purifié avec une colonne d'Oligo(dT) puis utilisé pour synthétiser …

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Identification de gènes spécifiquement exprimés dans le neuroépithélium de l'amphibien Ambystoma mexicanum
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L'involution, au cours de la gastrulation du chordomesoderme conduit à la différenciation de l'ectoderme indifférencié en ectoderme neural ou neuroépithélium. Le développement du neuroépithélium en un tube, le tube neural, implique l'expression temporelle et spatiale d'une série de gènes spécifiques. En vue d'identifier et caractériser ces gènes, nous avons construit une génothèque d'ADN complémentaire (ADNc) correspondant aux messagers exprimés chez des neurulas (stade 16) d'Ambystoma mexicanum (axolotl). Nous avons isolé l'ARN total par la méthode du LiCl qui donnait un ARN d'excellente qualité et très bon rendement. L'ARN poly(A)+ a été purifié avec une colonne d'Oligo(dT) puis utilisé pour synthétiser …

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